去甲金霉素残留溶剂方法学验证.docVIP

盐酸去甲基金霉素残留溶剂测定方法学验证 根据《药品质量标准分析方法验证指导原则》的要求进行：（A）残留溶剂测定方法的专属性验证，（B）检测限验证、（C）定量限验证、（D）精密度验证数据，（E）线性范围、（F）回收率验证。（G）耐用性验证数据。样品批号：090930010、090930020、091030010 （A）专属性验证 1. 专属性试验方法描述: 1.1试验条件 气相色谱仪：Agilent 6890N，配有FID检测器和G1888顶空进样器 色 谱 柱：Agilent HP-5(5%)苯基－甲基聚硅氧烷为固定液毛细管柱， 30m×320μm×0.25μm 柱 温：100℃ 汽化温度：200℃， 检测器温度250℃， 氢气（H2）：40ml/min， 空气：（Air）：400ml/min，分流比5∶1 载气：高纯氮气（N2）（纯度≥99.999%） 恒流1.0ml/min， Agilent G1888顶空进样器条件： 顶空瓶温度：100℃，定量环温度：105℃，传输线温度：110℃ 样品瓶恒温30分钟，加压、填充、平衡均为0.2分钟，进样时间1.0分钟 1.2 试剂 乙酸丁酯、正丁醇、丙酮和二甲基亚砜均为分析纯。 1.3出峰次序 分别取丙酮、正丁醇、乙酸丁酯和二甲基亚砜各约5μl，分别置10ml顶空瓶中，压盖密封，按顶空进样法操作分别进样，记录色谱图（数据文件号：091025000001.D~091025000004.D）。 结果出峰次序为：丙酮→正丁醇→乙酸丁酯→二甲基亚砜。 1.4分离度试验及干扰试验（色谱条件同1.1项下的一致）。 1.4.1分别取丙酮、正丁醇、乙酸丁酯各约125mg，精密称定，置同一100ml量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀（作为对照贮备液1#），精密量取2ml置10ml顶空瓶，摇匀。 称量记录： 丙酮：0.1246mg 正丁醇：0.1251mg 乙酸丁酯：0.1248 mg 1.4.2取去甲基金霉素样品约0.5g，精密称定，置10ml顶空瓶中，精密加二甲基亚砜2ml后，压盖密封，超声使溶解，摇匀，作为样品溶液。 称重记录：去甲基金霉素样品（批号：090930010）：0.5002 g 1.4.3取去甲基金霉素样品约0.5g，精密称定，置10ml顶空瓶中，精密加对照贮备液(1#) 2ml后，压盖密封，超声使溶解，摇匀，作为（样品+对照）溶液。 称重记录：去甲基金霉素样品（批号：090930010）：0.5001 g 1.4.4取1.4.1、1.4.2、1.4.3项下的三种溶液按顶空进样法顶空进样，记录色谱图（数据文件号：091025000005.D~091025000007.D）。 1.5 结论： 各待测成分之间分离较好，样品对各待成分没有干扰，专属性较强。 （B）定量限验证 2.定量限试验方法描述：（定量限按S/N＝10计算） 2.1.试验条件：（色谱条件同1.1项下的一致） 2.2测定方法： 正丁醇定量限试验 对照溶液(2#)：精密量取对照贮备液（1#）1ml，置100ml量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液2#，取2ml置10ml顶空瓶中，依法操作，记录色谱图（数据文件号：091025000008.D）。 正丁醇S=0.712795，N=0.07029，S/N=10.1 正丁醇的浓度为： 125.1/100×1/100=0.01251mg/ml 正丁醇的定量限（相对于样品的测定浓度）为： 125.1/100×1/100×2/500×106=50.04ppm 乙酸丁酯定量限试验 对照溶液(3#)：精密量取对照溶液1# 0.5ml，置100ml量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液3#，取2ml置10ml顶空瓶中，依法操作，记录色谱图（数据文件号：091025000009.D）。 乙酸丁酯S=0.643954，N=0.06705，S/N=9.6 乙酸丁酯的浓度为： 124.8/100×0.5/100=0.00624mg/ml 乙酸丁酯的定量限（相对于样品的测定浓度）为： 124.8/100×0.5/100×2/500×106=24.96ppm 丙酮定量限试验 对照溶液(4#)：精密量取对照溶液1# 0.2ml，置100ml量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液4#，取2ml置10ml顶空瓶中，依法操作，记录色谱图（数据文件号：091025000010.D）。 丙酮S=0.613507，N=0.06616，S/N=9.3 丙酮的浓度为： 124.6/100×0.2/100=0.0024922mg/ml 丙酮的定量限（相对于样品的测定浓度）为： 124.6/100×0.2/100×2/500×1