第二章 糖和甙2011.pptVIP

四、羰基反应 还原糖和一分子苯肼缩合生成糖苯腙，多数糖苯腙是水溶性的，选择适当的肼可以制得糖腙以鉴别糖类，也可用于分离和纯化糖。 糖和过量的苯肼作用，在C1和C2导入两分子苯肼，生成糖脎。多难溶于水。 2-去氧糖不成脎。 五、硼酸络合反应 糖及其它许多具有邻二羟基的化合物可与硼酸（钼酸、铜氨、碱土金属等）生成络合物，可用于糖、苷等化合物的分离、鉴定以及构型的确定。 应用： 络合产物具有酸性，可采用中和滴定的方法进行含量测定。 络合产物可用离子交换法进行分离。 络合产物可用电泳进行分离和鉴定。 可用掺有硼砂的硅胶进行层析。 第四节、苷键的裂解（糖链的降解） 酸催化水解反应(醇解) 碱催化水解和β-消除反应 酶催化水解 氧化开裂法 1. 酸催化水解反应 水解难易规律:苷原子的电子云密度 和空间环境,有利于苷键原子质子化和中间体形成的一切因素有利于苷键的水解 苷原子不同:N-苷 O-苷 S-苷 C-苷（碱度高的易水解） 呋喃糖 吡喃糖 (50-100倍)（形成中间体张力减小） 酮糖醛糖（酮糖为呋喃糖） 吡喃糖苷中C5位的取代基越大越难水解,即:五碳糖甲基五碳糖六碳糖七碳糖-COOH取代 去氧糖羟基糖氨基糖 酚苷醇苷（有供电子基团） 氮原子位于酰胺或嘧啶位置时,N-苷难于用矿酸水解.（p7.9） 糖醛酸苷由于羧基的吸电子性，影响苷原子的碱度，难水解。pH值高时，水解易于进行。 酸水解方法 酸水 5~10%HCl/0.005M H2SO4快速水解果聚糖，五六碳聚呋喃糖。 0.5~1.0MH2SO4五六碳聚吡喃糖； 纤维素溶于72%的冷H2SO4，加水稀释至0.5~1.0M，加热。 两相水解法：对酸不稳定苷元用酸水/有机溶剂（后加） 2. 碱催化水解和β-消除反应 通常苷键对碱稳定，不易被碱水解。而醇苷、酰苷、酚苷、与羰基共轭的烯醇苷、苷键β位有吸电子基团的苷易被碱水解。 β-消除反应： 苷键β位有吸电子基团可使α位氢活化，有利于OH- 的进攻，因此可与苷键发生消除反应而开裂苷键。 在1→3或1→4连接的聚糖中，还原端的游离醛（或酮）能使邻位氢活化而与3-O- 或4-O-苷键起消除反应。因此能够使聚糖还原端的单糖逐个剥落，对非还原端则无影响。 3. 酶催化水解 用酶水解苷键可以获知苷键的构型，可以保持苷元结构不变，还可以保留部分苷键得到次级苷或低聚糖，以便获知苷元和糖、糖和糖之间的连接方式。 特点：反应条件温和、专属性高、能够获得原苷元等。 常用的苷键水解酶 转化糖酶（水解β-果糖苷键） 麦芽糖酶（水解α-D-葡萄糖苷键） 纤维素酶（水解β- D-葡萄糖苷键） 杏仁苷酶（水解β-六碳醛糖苷键） 所用试剂为：NaIO4、NaBH4 4. 过碘酸裂解反应(Smith裂解法） C-苷的水解：比原苷元多一个醛。 特点：反应条件温和、易得到原苷元；可通过产物推测糖的种类、糖与糖的连接方式以及氧环大小。 适用范围：苷元不稳定的苷和碳苷（得到连有一个醛基的苷元），不适合苷元上有邻二醇羟基或易被氧化的基团的苷。 5、糖醛酸苷的选择性水解反应 糖醛酸的苷键是很难用稀酸水解的，需要采用一些特殊的选择性水解反应，如紫外光照射法、四醋酸铅分解法、醋酐-吡啶法等。 第五节、糖链结构的测定 （一）纯度鉴定 常用的纯度鉴定法有：超速离心法；比旋度；毛细管电泳；HPLC等。 电泳是常用的鉴定纯度方法。 　多糖的分子量只是一种统计平均值。 （二）分子量的测定 单糖、低聚糖及其苷的分子量测定目前大多用质谱法。 　　在不同型号的Sephadex或Sepharose柱层析上测定多糖分子量是用量小、操作简便的方法。 　　工作中需要一系列结构相似的已知分子量的多糖作标准曲线。 （三）单糖的鉴定 鉴定糖的种类 一般是将苷键全水解，水解产物鉴定。 ①色谱法：PC；TLC；GC（衍生物）；HPLC ②NMR：化学位移；J值 ③化学法：如Molish反应 （四）单糖之间连接位置的决定 将糖链全甲基化，然后水解苷键，鉴定所获得的甲基化单糖，其中游离-OH的部位就是连结位置。 目前常使用 13C-NMR 方法。 一、提取 单糖、低聚糖及苷类化合物：水或醇提 不同的有机溶剂萃取 不同极性的化合物。 多糖：热水、稀碱或稀酸溶液进行提取。 植物体内苷常与其对应的水解酶共存，所以要采用杀酶保苷的方法。为防止苷在提取中发生水解，可用乙醇或沸水作为溶剂进行提取。 第六节　 糖及苷的提取分离 中药粗份 醇提 石油