2015年高考生物总复习配套选修3 专题14 基因工程生物技术安全性和伦理问题.ppt

(1)在获得单链模板的方式上，PCR 扩增与体内 DNA 复制 不同，前者通过______________解开双链，后者通过__________ 解开双链。 (2)据图分析，胎儿的基因型是______(基因用 A、a 表示)。 患儿患病可能的原因是_______________的原始生殖细胞通过 ______________过程产生配子时，发生了基因突变；从基因表 达水平分析，其患病是由于_______________________________ _________________。 (3)研究者在另一种贫血症的一位患者β链基因中检测到一 个新的突变位点，该突变导致β链第 102 位的天冬酰胺替换为苏 氨酸。如果________________，但________________________， 则为证明该突变位点就是这种贫血症的致病位点提供了一个有 力证据。 [解析](1)PCR 是体外扩增 DNA 的方式，通过高温使双链解 开，体内 DNA 的复制则是通过解旋酶使 DNA 双链解开。 (2)由题意可知重度β地中海贫血是隐性遗传病，突变后的 序列可以被剪切成 m 和 s 的两个片段，而正常序列无法被剪切， 因此母亲、父亲、患儿和胎儿的基因型分别为：AA、Aa、aa 和 Aa，母亲和父亲的基因型为 AA 和 Aa，生下患儿可能是因 此母亲的原始生殖细胞通过减数分裂产生配子时发生了基因突 变。由图可知，其突变为由模板链的GTC 突变成ATC，mRNA 上由 CAG 变成 UAG，因此终止密码子提前出现，使翻译提前 终止。 (3)如果这种贫血可以遗传给后代，而又能证实不是重型地 中海贫血，即β链不能被限制酶切割，则为证明该突变位点就是 这种贫血病的致病点提供了有力证据。 [答案](1)热变性原理 解旋酶 (2)Aa 母亲 减数分裂 翻译提前终止形成异常血红蛋 白 (3)该病可遗传给后代 患者的β链不能被限制性酶切割 二、基因工程的基本操作程序 1.目的基因的获取： (1)目的基因：主要是编码蛋白质的结构基因(人类所需的)。 (2)获取方法： ①从自然界已有的物种中分离：从基因文库或 cDNA 文库 中获取。 ②人工合成：反转录法、化学合成法。 ③利用 PCR 技术扩增。 说明：基因文库相当于某种生物的基因仓库，储备着大量 该物种的基因。 2.基因表达载体的构建——重组质粒的构建。 (1)基因表达载体的组成：目的基因＋标记基因＋启动子＋ 终止子。 (2)构建步骤： (3)构建载体主要考虑的因素： ①具有选择性标记基因：如抗生素基因，以便选择出真正 的转基因生物。 ②用作载体的质粒的插入部位前须有启动子，后须有终止 子。 ③使用与获取目的基因相同的限制酶，这样形成的黏性末 端碱基之间互补，便于连接。 方法 主要适用范围 受体细胞 植物细胞 农杆菌转化法 双子叶植物、 裸子植物 体细胞 花粉管通道法 抗虫棉 受精卵 基因枪法 单子叶植物 体细胞 动物细胞 显微注射法 动物 受精卵 病毒侵染法 微生物细胞 转化法(CaCl2) 原核生物 大肠杆菌等 3.目的基因导入受体细胞的方法： 4.目的基因的检测方法： (1)导入检测：DNA 分子杂交法(使用 DNA 探针)检测目的 基因。 (2)表达检测： ①转录检测：分子杂交法，用标记的目的基因作为探针与 mRNA 杂交，检测 mRNA。 ②翻译检测：抗原－抗体杂交，提取蛋白质，用相应的抗 体进行抗原－抗体杂交。 (3)个体生物学水平鉴定：如作物抗性的鉴定等。 【典例】北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具 有 11 个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越 强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述 正确的是( ) A.过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因 组测序 B.多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能 得到抗冻性增强的抗冻蛋白 C.过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌 才能进行筛选 D.应用 DNA 探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中 目的基因的存在及其完全表达 [解析](1)读懂图：过程①是通过反转录形成目的基因， ②是构建基因表达载体，再通过农杆菌转化法将目的基因导入 番茄体细胞中，经组织培养形成抗冻番茄植株。 (2)拓展基本概念：基因包括编码区和非编码区，编码区能 指导蛋白质形成，非编码区不指导蛋白质合成，但其中有调控 编码区的部位，如 RNA 聚合酶结合位点；原核细胞的编码区是 连续的，而真核细胞的编码区是不连续的，包含外显子和内含 子，只有前者能编码蛋白质，经转录后形成的成熟 mRNA 不含