Sonic+hedgehog改善内皮祖细胞功能促进1型糖尿病伤口愈合的研究.pdfVIP

Sonic hedgehog 改善内皮祖细胞功能促 1 型糖尿病伤口愈合的研究 管生成实验和细胞迁移检测，观察内皮祖细胞 Shh 通路激活后的小管形成和迁移 能力的变化。 结果 1.给于 Shh 信号通路激动剂（SAG）处理的 1 型糖尿病内皮祖细胞 western blot 法检测中下游因子 GLI-1 蛋白表达增高 （P0.05），细胞小管形成能 力（P0.05）和迁移功能（P0.05）得到改善。 2.过表达 Shh 慢病毒转染处理的 1 型糖尿病内皮祖细胞 western blot 法检 测中下游因子 GLI-1 蛋白表达增加 （P0.05），细胞小管形成能力（P0.05） 和迁移功能（P0.05）得到改善。 小结 1. 1 型糖尿病小鼠 EPCs 的 Shh 通路下调，给予激动剂 SAG 可增加下游因子 GLI-1 蛋白的表达。 2．1 型糖尿病小鼠 EPCs 功能下降，体外给予 Shh 受体激动剂 SAG，细胞小 管形成能力（P0.05）和迁移功能（P0.05）得到改善。 3．糖尿病EPCs 成功感染过表达 Shh 病毒，MOI 值为 10. 4. Shh 过表达糖尿病内皮祖细胞 western blot 法检测下游因子 GLI-1 蛋白 表达增加（P0.05） 5．Shh 过表达糖尿病内皮祖细胞，细胞小管形成能力（P0.05）和迁移功 能（P0.05）得到改善。 第二部分 Sonic hedgehog 过表达糖尿病内皮祖细胞功能促进 1 型 糖尿病伤口愈合 4 万方数据 Sonic hedgehog 改善内皮祖细胞功能促 1 型糖尿病伤口愈合的研究 目的 探讨 Shh 过表达糖尿病内皮祖细胞对 1 型糖尿病伤口愈合的影响。 方法 1.1 型糖尿病模型 10 周后建立皮肤全层缺损模型，随机分为 Control 组， DM 组，DM+EPCS 组，在伤口周围分别多点注射生理盐水，内皮祖细胞（来源于 GFP 小鼠）。定期观察实验组和对照组伤口愈合情况，并于第 18 天取伤口周围 直径 1cm 面积全层皮肤组织，冰冻切片后直接在荧光显微镜下观察内皮祖细胞参 与伤口愈合的情况，用免疫组织化学法，HE 染色法，观察皮肤组织血管新生及 肉芽组织修复情况。 2.1 型糖尿病模型 10 周后建立皮肤全层缺损模型，随机分为 CONTROL 组， DM 组，DM+EPCS 组，DM+EPCS(SHH)组，在伤口周围分别多点注射生理盐水，内皮 组细胞（来源于糖尿病小鼠），转染过表达 Shh 慢病毒内皮祖细胞。定期观察实 验组和对照组伤口愈合情况，并于第 18 天取伤口周围直径 1cm 面积全层皮肤组 织，冰冻切片后用免疫组织化学法，HE 染色法，Mason 染色法观察皮肤组织血管 新生及胶原组织，肉芽组织修复情况。 结果 1.皮肤全层损伤模型（1）显示：与对照组相比，糖尿病伤口愈合缓慢（P0.05）, 内皮祖细胞促进糖尿病伤口愈合（P0.05）。荧光显微镜下，内皮祖细胞 实验组皮下组织可见位于散落点状荧光。免疫组化显示，内皮祖细胞实验 组小血管数目多于糖尿病对照组。HE 染色显示，实验组与正常皮肤结构形 态相似，对照组可见上皮化，但上皮组织薄。 2.皮肤全层损伤模型（2）显示：糖尿病伤口愈合缓慢（P0.05）,转染过表 达 SHH 慢病毒内皮祖细胞促进糖尿病伤口愈合（