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食用玫瑰生物类黄酮提取工艺研究
食用玫瑰生物类黄酮提取工艺研究
【摘 要】 本论文对食用玫瑰花中的生物类黄酮的提取工艺进行研究,并通过一系列的乙醇提取单因素实验和正交实验,得到了食用玫瑰黄酮提取的最佳工艺,即固液比1:20,pH值为7.80的乙醇浓度为70%,温度为80℃,提取时间120min。为食用玫瑰工业化的生产研究提供理论基础。
【关键词】 食用玫瑰 黄酮 提取
前言
玫瑰,学名Rosa rugosa,别名红玫瑰、梅槐、刺玫瑰,蔷薇科,蔷薇属,落叶直立灌木。食用玫瑰中含有丰富的黄酮类化合物,黄酮类化合物作为一种功能成分,具有增强心血管功能、抗肿瘤、增强免疫力、延缓衰老等作用。在国外, 近年来对黄酮类化合物的研究开发十分活跃, 但在国内保健食品生产中开发较多的只有银杏黄酮、山楂黄酮、茶叶黄酮等[1]。
本论文以食用玫瑰为研究对象,对食用玫瑰中生物类黄酮的提取工艺进行初步的研究和评价,希望我们的研究能为进一开发天然高效食品抗氧化剂、食品添加剂、研制功能性食品及开发医药材料提供理论指导。
1. 实验材料、主要药品、仪器及实验方法
1.1实验材料
玫瑰花:本研究所采用的实验材料为新鲜的食用玫瑰花
1.2实验主要仪器设备
索氏抽提器,电子分析天平,紫外可见分光光度计,旋转蒸发仪,高速离心机,真空泵,恒温循环水箱,电热干燥箱,恒温搅拌循环水浴锅,PHS-2S酸度计,酒精度计等。
1.3实验主要试剂
芦丁、没食子酸、棚皮素标样;乙醚、乙酸乙酯、丙酮、无水乙醇、冰乙酸柠檬酸、氢氧化钠、氢氧化钙、三氯化铝、亚硝酸钠、硝酸铝(以上均为分析纯);
1.4食用玫瑰黄酮的测定方法
采用比色法[2], AlCl3与黄酮类物质作用后,生成黄酮得到黄色铝络合物。
1.5食用玫瑰花黄酮提取工艺的研究[3]
1.5.1黄酮提取单因素实验[4]
(1)提取方法筛选试验
①乙醇索氏抽提法
准确称取5.00克玫瑰粉,用滤纸包好放入索氏抽提器中,加入100mL95%乙醇90℃抽提1h,定容,测定黄酮萃取率。
②丙酮浸提法
准确称取5.00克玫瑰粉,用100mL80%丙酮80℃回流浸提1h,抽滤,用80%丙酮洗涤滤渣至洗涤液无色??定容,测定黄酮萃取率。
③热水提取法
准确称取5.00克样品,加入100mL蒸馏水,90℃浸提1h,定容,测定黄酮萃取率。
④碱溶酸沉法
准确称取5.00克样品,加入100mL蒸馏水,煮沸,在搅拌条件下缓慢加入石灰乳调节pH值为9.0,在此条件下,微沸60min,趁热滤布过滤,用90℃蒸馏水洗涤滤渣至洗涤液无色,合并滤液与洗涤液,在60~70℃下用HCl溶液调节pH值至5.0,搅匀,静置24h,抽滤,用蒸馏水洗涤沉淀物至中性,真空浓缩干燥得粗提物,用60%乙醇配制成样品液,定容,测定黄酮萃取率。
(2)乙醇浓度对黄酮浸出率的影响试验
准确称取5.00克食用玫瑰,用l00mLpH8.15的不同浓度乙醇溶液,在80℃温度下回流浸提2h,抽滤,定容,测定不同浓度乙醇的黄酮浸出率。
(3)浸提温度对黄酮浸出率的影响试验
准确称取5.00克食用玫瑰,用l00mLpH8.15的50%乙醇溶液,在不同温度下回流浸提2h,抽滤,定容,测定不同浸提温度的多测定黄酮浸出率。
(4)浸提时间对黄酮浸出率的影响试验
准确称取5.00克食用玫瑰叶,用l00mLpH8.15的50%乙醇溶液,在80℃温度下回流浸提不同时间,抽滤,定容,测定不同浸提时间的测定黄酮浸出率。
(5)料液比(m/V)对黄酮浸出率的影响
准确称取5.00克食用玫瑰,分别用不同体积的pH8.15的50%乙醇溶液,在80℃温度下回流浸提2h,抽滤,定容,测定不同料液比的测定黄酮浸出率。
(6)浸提溶剂pH值对黄酮浸出率的影响实验
准确称取5.00克食用玫瑰,用100mL不同pH值的50%乙醇溶液,在80℃温度下回流浸提2h,抽滤,定容,测定不同溶剂pH值的测定黄酮浸出率。
(7)正交实验
对影响黄酮浸出率的乙醇浓度、浸提温度、浸提时间、料液比(m/V)、浸提溶剂pH值进行正交试验,试验的因素水平如表所示,以黄酮浸出率为指标,优化浸提工艺条件。
表 正交实验因素水平表
2. 结果分析
2.1食用玫瑰花总黄酮检测方法的建立
在碱性溶液中,黄酮类化合物与衬Al3+生成红色络合物,用芦丁试验结果表明在420nm波长处有最大吸收峰。同时分析得到标准曲线的回归方程,为Y=0.0007x+0.0362,r=0.9998,表明在100~800цg/mL浓度范围内,浓度与吸光度有良好的线形关系。
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