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提高细菌耐药性监测质量努力做好细菌耐药性监测(20140330昆明)课件_1
标准化的药敏方法 纸片扩散法(K-B) 合适的培养基 重要的质控菌 正确的抗菌药物组合 正确的药敏试验及报告非常重要! 1、标准化的药敏方法 标准化的药敏方法 稀释法 扩散法(纸片法 K-B)法 E-Test 正确的药敏组合 合适的培养基 正确的接种菌量 合适的培养环境 正确的阅读结果 及时正确地报告 肉汤微量稀释法 肉汤(试管)稀释法 2μg/ml 1μg/ml 0.5μg/ml 琼脂(平板)稀释法 纸片法 K-B法 E-试验(E-Test) 原理:基本同扩散法,即浓度呈连续梯度的抗菌药物从塑料纸条中向药敏琼脂中扩散,在试条周围浓度范围内检测菌的生长被抑制,从而形成透明的抑菌圈。 E-test综合了稀释法和扩散法的原理和特点,直接定量测出药物对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)。 菌液, 药敏平板 同K-B法 E-Test条 宽5mm, 长60mm 抑菌圈 -椭圆形 结果 -MIC Commercial AST Systems Vitek 2 MicroScan Sensititre Phoenix Etest BIOMIC 什么时候可以使用E-试验? 临床治疗要求了解某种抗菌药物确切的MIC值以及MIC的范围 当某种抗菌药物对某种细菌的纸片法药敏结果不可靠时,如万古霉素对MRSA 要核实常规方法获得的药敏结果正确性 苛养菌 肺炎链球菌 β-溶血性链球菌 流感嗜血杆菌 厌氧菌 当进行以下检测时,需用MIC法而不能用纸片扩散法… 葡萄球菌-万古霉素;达托霉素 肠球菌-万古霉素“中介”结果;达托霉素 不动杆菌属,洋葱博客霍尔德菌,嗜麦芽窄食单胞菌-许多药 肺炎链球菌-青霉素,头孢噻肟/头孢曲松 草绿色链球菌-青霉素 Beta 溶血链球菌-达托霉素 MIC结果和敏感,中介,耐药的解释对下列疾病相关的分离菌种是有用的: 心内膜炎 脑膜炎 败血病 骨髓炎 免疫抑制 假体装置 虽然“敏感”,但是对抗菌药无反应的病人 举例: 囊性纤维化患者中分离的铜绿假单胞菌对托布霉素需要雾化处理时: 囊性纤维化患者有时需要雾化托布霉素治疗 托布霉素的浓度: 肺 雾化吸入 32-64 μg/mg 血清 静脉给药 4–10 μg/ml 自动化仪器常规 托布霉素MIC 通常 ≤16 μg/ml E-试验和稀释法: E-试验可以达到256 μg/ml (此外粘液状生长的菌株肉汤培养液内生长较慢) 原则:针对靶细菌设计药敏试验的抗菌药物的品种和数量 CLSI抗菌药物选择的原则(A、B、C、U组) 根据病原菌的种类 革兰阳性球菌 葡萄球菌、肠球菌 、链球菌等 革兰阴性杆菌 肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌等 根据本单位临床实际需要 2、正确的抗菌药物组合 FDA批准临床微生物室常规药敏试验分组 细菌: ?肠杆菌科、铜绿假单胞菌、葡萄球菌属、肠球菌属和不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌、嗜麦芽窄食单胞菌、其他非肠杆菌科细菌(MIC) ?嗜血杆菌属、淋病奈瑟球菌、肺炎链球菌、 α -、β-溶血性链球菌 A组 为常规的一级试验组合并常规报告结果 B组 亦可用于一级试验,但应选择性报告,即当A组药物耐药时可以选择性地报告B组中的同类药物 C组 为补充性药物,可选择性报告 U组 为补充性药物,主要用于治疗尿路感染的选择用药 肠杆菌科细菌的抗菌药物选择 抗菌药物 A B C U 抗菌药物 A B C U O 阿米卡星 √ 亚胺培南 √ 庆大霉素 √ 美罗培南 √ 氨苄西林 √ 厄他培南 √ 哌拉西林 √ 环丙沙星 √ 头孢唑啉 √ 氨苄西林/舒巴坦 √ 头孢克罗 √ 头孢哌酮/舒巴坦 √ 头孢呋辛 √ 哌拉西林/他唑巴坦 √ 头孢噻肟 √ 头孢美唑 √ 头孢他啶 √ 头孢噻肟/克拉维酸 √ 头孢吡肟 √ 头孢他啶/克拉维酸 √ SXT-TMP √ √ 妥布霉素 √ 葡萄球菌的抗菌药物选择 抗菌药物 A B C U O 抗菌药物 A B C U O 青霉素 √ 万古霉素 √ 庆大霉素 √ 替考拉宁 √ 苯唑西林 × 左氧氟沙星 √ 头孢西丁 √ SXT-TMP √ √ 头孢唑啉 × 磷霉素 × 克林霉素 √ 呋喃妥因 √ 红霉素 √ 利福平 √ 利奈唑胺 √ 达托霉素 √ 四环素 √ 头孢洛林 √ 2013年MRSA检测取消了苯唑西林K-B法,B类增加了头孢洛林 3、合适的培养基 普通细菌 肠杆菌科细菌、假单胞菌属、不动杆菌属、葡萄球菌属、肠杆菌属等 MH琼脂培养基(Mueller-Hinton Agar) 肺炎链球菌及其他链球菌 5%脱纤维羊血+MH琼脂培养基 嗜血杆菌属 嗜血杆菌培养基(HTM)+SR158添加剂 4、正确的菌液
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