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八角茴香中莽草酸超声辅助提取工艺研究 　　摘要：对超声辅助提取八角茴香中莽草酸的提取工艺进行了研究，在单因素实验基础上，通过正交试验对工艺条件进行了优化。结果表明，提取莽草酸的最佳工艺条件是：料液比为1∶15、乙醇浓度为30%、提取时间为30min、提取温度为60℃，在此条件下莽草酸的提取率为3.38%。 　　关键词：八角茴香莽草酸超声辅助提取 　　 　　前言 　　八角茴香为木兰科植物八角的干燥成熟果实，主要产于东南亚和我国的南方地区，是我国南方重要的“药食同源”经济树种，是我国特产辛香料和中药。八角茴香具有多种生物活性，如抗炎、镇痛之效，温阳散寒，理气止痛等功能，一般作为食用香料使用。莽草酸(Shikimic Acid)，化学名为[3R-(3α,4α,5β)]-3,4,5-三羟基-1-环己烯-1-羧酸。研究表明，莽草酸具有较强的镇痛和抑制血小板聚集的作用，是合成抗流感药物“达菲”的中间原料[1-3]。近几年来，随着人们对禽流感的日益关注，从植物中提取莽草酸成为天然产物领域研究的热点之一。本文采用超声辅助提取八角茴香中的莽草酸，旨在为八角茴香的综合利用和莽草酸的提取提供理论参考。 　　1 实验 　　1.1 仪器与试剂 　　8825-120T型220V 50H超声波清洗仪(宁波新芝生物科技股份有限公司)；JY3002电子天平(上海精密科学仪器有限公司)；SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(220V 180W，巩义市子华仪器有限责任公司)；800型离心机(220V 50HZ，上海技术器械厂)；Cary 50紫外－可见分光光度计(美国瓦里安公司)；DGG－9140B型电热恒温鼓风干燥箱(上海森信试验仪器有限公司)；HH-2型电热恒温水浴锅(北京科伟永兴仪器有限公司)等。 　　八角茴香(市场购买，经干燥、粉碎过60目筛，最后用石油醚脱脂，干燥密封备用)；莽草酸标准品(98%西安飞达生物有限公司)；其余无水乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮等均为分析纯。 　　1.2 实验方法 　　1.2.1 工艺流程 　　八角茴香→烘干→粉碎→过60目筛→石油醚脱脂→称一定量的样品→移入50mL锥形瓶→加入一定量的乙醇溶液→超声提取→减压抽滤→提取液。 　　1.2.2 样品液制备 　　准确称取一定量八角茴香样品，将一定浓度的乙醇作为提取剂，按设定好的液???比(mL/g)加入锥形瓶中，在一定的超声时间、超声温度下进行提取，提取液真空抽滤，滤液50℃减压蒸干，剩余物加入5mL的乙酸乙酯于50℃下浸泡10min，倾去上层清液，残留物再用10mL丙酮回流洗涤两次，再次倾去上层清液，残留物用少量甲醇溶解，离心20min，将上层液用10mL甲醇定容，待测。 　　1.2.3 最大吸收波长的确定 　　用甲醇定容提取物，以未加标准对照品的空白试剂作参比，用紫外可见分光光度计在200～500nm下进行最大吸收波扫描。结果如图1所示，提取液的最大吸收波为212.0nm与文献[4-5]中报道的莽草酸最大吸收波长一致。 　　1.3 标准曲线的绘制 　　准确称取莽草酸标准品0.01g于50mL的容量瓶中，用甲醇配制成浓度为0.2mg/mL的母液。分别吸取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、1.0、1.2mL的溶液分别移入10mL的容量瓶中用甲醇稀释定容至刻度。配制成不同浓度的标准液，用紫外－可见分光光度计在212.0nm波长下测定各标准溶液的吸光度。再以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线[6]，得回归方程为y=35.445x+0.0539，决定系数R2=0.9991，说明在0.004～0.024mg/mL浓度范围内，莽草酸的甲醇溶液有良好的线性关系。 　　1.3.1 莽草酸提取率的计算 　　将1.2.2制得的样品液在212.0nm处测定吸光度，最后按下式计算提取率： 　　 　　 　　 　　式中：A为提取液吸光度；m为称取八角茴香干粉的质量(g)。 　　2 结果与讨论 　　2.1 单因素实验 　　2.1.1 料液比对提取率的影响 　　固定提取温度为60℃，提取时间为30min，乙醇浓度为40%，改变料液比，考察不同料液比对提取率的影响，结果如表1所示。 　　表1料液比对莽草酸提取率的影响 　　料液比(mg/mL) 1∶5 1∶10 1∶15 1∶20 　　提取率% 1.30 2.85 3.31 3.33 　　 　　 　　由表1可知，莽草酸的提取率随着料液比的增大而增大，当料液比达到1∶20时，提取率基本不变。这是因为当料液比为1∶15时，莽草酸已基本溶出，而过大的料液比也会造成溶剂和能源的浪费。适当的料液比可充分提取出原料中的莽草酸，并减少溶剂的消耗从而降低成本。所以综合考虑，料液比取1