三叶青冻干粉抗炎作用实验研究.docVIP

三叶青冻干粉抗炎作用实验研究 　　[摘要] 目的 探讨三叶青冻干粉的抗炎作用。 方法 设三叶青冻干粉三个剂量组，另设阳性对照和溶剂对照组，采用经口给药方式，给药后观察三叶青冻干粉对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑制作用、对小鼠毛细血管通透性的影响以及对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的抑制作用。 结果 三叶青冻干粉在7.16 g/kg和3.58 g/kg剂量下能有效抑制二甲苯致小鼠耳肿胀作用；7.16 g/kg对醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管的通透性有抑制作用；在5.0 g/kg和2.5 g/kg剂量下能显著抑制由角叉菜胶所致的大鼠足跖肿胀。 结论 三叶青冻干粉有显著的抗炎活性。 　　[关键词] 三叶青；冻干粉；抗炎作用 　　[中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2013）30-0013-02 　　三叶青（radix tetrastigmae）为葡萄科植物三叶爬藤（Tetrastigmahemsleyanum Dielset Gilg）的干燥块根，是浙江地道药材之一[1]，以块根或全草入药[8]，具有清热解毒、祛风化痰、活血止痛的功能[2]。近来关于三叶青的研究较多，但多集中在抗肿瘤方面[3～5，9]，对于三叶青抗炎方面研究较少，而且多采用的是三叶青提取物，在提取过程中，大多需要加热等过程，造成成分损失[2]，因而不能很好显示其真正效果。基于此，本文在2012年5～10月采用最大限度保留其有效成分的三叶青冻干粉来进行研究，以期较为全面地观察三叶青的抗炎作用，为以后进一步研究提供基础。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　1.1.1 受试物与试剂 三叶青冻干粉白色粉未，由杭州天惠医药科技有限公司提供；二甲苯（批号，成都市科龙化工试剂厂；伊文思蓝（批号，瑞士Fluka公司进口分装；角叉菜胶，Sigma公司进口分装，25 g/瓶。 　　1.1.2 实验动物 ICR小鼠，SPF级，体重18～22 g，雌性50只，合格证号：2008001619934；雄性50只，合格证号：2008 001620192。大鼠，体重170～200 g，雌性50只，合格证号：2008001624785。以上均由上海斯莱克实验动物有限公司提供，饲养在屏障环境中，自由进食饮水，试验前适应5 d。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 三叶青冻干粉对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑制作用 取雌性ICR小鼠50只，随机分为5组，即水对照组（30 mL/kg）、吲哚美辛对照组（15 mg/kg）、三叶青冻干粉高剂量组（7.16 g/kg，相当于新鲜药材46.44 g/kg）、三叶青冻干粉中剂量组（3.58 g/kg，相当于新鲜药材23.22 g/kg）、三叶青冻干粉低剂量组（1.79 g/kg，相当于新鲜药材11.61 g/kg）。各组动物连续给相应受试物3 d，末次给药后30 min，小鼠右耳廓内外用二甲苯均匀涂抹，用量0.1 mL，以引起炎症反应，左耳不加处理作为自身对照。致炎后1 h将小鼠脱颈椎处死，用打孔器（直径9 mm），将左右耳片分别敲下后称重，每只动物右、左耳片重量差即反映炎症肿胀程度。 　　1.2.2三叶青冻干粉对小鼠毛细血管通透性的影响 取雄性ICR小鼠50只，随机分为5组，分组情况同上。各组动物连续给相应受试物3 d，末次给药后30 min，小鼠尾静脉注射0.5%依文思蓝0.1 mL/kg，并立即注射0.6%醋酸0.2 mL/只，30 min后将小鼠脱颈椎处死，剪开腹腔，用5 mL生理盐水冲洗腹腔2次，合并冲洗液，以 3 000 rpm离心10 min，取上清液于721型分光光度计590 nm处比色，测定其OD值。 　　1.2.3 三叶青冻干粉对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的抑制作用 取雌性SD大鼠50只，体重170～200 g，随机分为5组，即水对照组（30 mL/kg）、强的松组（5.4 mg/kg）、三叶青冻干粉高剂量组（5.0 g/kg，相当于新鲜药材32.4 g/kg）、三叶青冻干粉中剂量组（2.5 g/kg，相当于新鲜药材16.2 g/kg）、三叶青冻干粉低剂量组（1.25 g/kg，相当于新鲜药材8.1 g/kg）。各组大鼠连续给相应受试物5 d，于注射前先测定大鼠右后足跖的厚度，末次给药后1 h，给各组大鼠右后足跖皮下注射1%角叉菜胶0.1 mL以致炎，分别测量致炎后1、2、4、6、24 h右后足跖的厚度（mm），以大鼠致炎后足跖厚度与致炎前足跖厚度差表示炎性肿胀程度。 　　1.2.4 数据分析 本实验数据用（x±s）表示，多组间均数比较采用方差分析，当总体方差有统计学意义（P 　　3 讨论 　　三叶青是较新的中药材，历代本草未见[1]，主要分布