第五讲-蛋白质合成.pptVIP

成熟多肽N-端第一个残基对蛋白质的稳定性有重要影响 。 * 5、肽链的终止 当终止密码子进入核糖体A位点时，在释放因子RF1-3的作用下： （1）水解末端肽基tRNA；（2）释放新生肽和tRNA；（3）使70S核糖体解离成30S和50S两个亚基。 释放因子有两类，I类释放因子识别终止密码子，并能催化新合成的多肽链从P位点的tRNA上水解释放出来；II类释放因子在多肽链释放后刺激I类释放因子从核糖体中解离出来。 释放因子在原核中有RF1-3。RF1 识别 UAA和UAG; RF2 识别 UAA和UGA; RF-3为II类释放因子，与核糖体的解离有关。释放因子行使功能时需要GTP。 真核生物中的I类和II类释放因子分别只有一种，eRF1和eRF3。I类释放因子eRF1能识别3个终止子。 6、蛋白质合成的抑制剂 ? 抗菌素对蛋白质合成的作用可能是 阻止mRNA与核糖体结合（氯霉素）， 阻止AA-tRNA与核糖体结合（四环素类） 干扰AA-tRNA与核糖体结合而产生错读（链霉素、新霉素、卡那霉素等）， 作为竞争性抑制剂抑制蛋白质合成。 ????? 链霉素是一种碱性三糖，可干扰fMet-tRNA与核糖体的结合，从而阻止蛋白质合成的正确起始，也会导致mRNA的错读。若以poly（U）作模板，则除苯丙氨酸（UUU）外，异亮氨酸（AUU）也会掺入。对链霉素敏感位点在30S亚基上。 嘌呤霉素是AA-tRNA的结构类似物，能结合在核糖体的A位上，抑制AA-tRNA的进入。它所带的氨基与AA- tRNA上的氨基一样，能与生长中肽链上的羧基生成肽键，这个反应的产物是一条3羧基端挂了一嘌呤霉素。 ????? 青霉素、四环素和红霉素只与原核细胞核糖体发生作用，从而阻遏原核生物蛋白质的合成，抑制细菌生长。氯霉素和嘌呤霉素既能与原核细胞核糖体结合，又能与真核生物核糖体结合，妨碍细胞内蛋白质合成，影响细胞生长。因此，前3种抗生素被广泛用于人类医学，后两种则很少在医学上使用。  八、氨基酸及功能蛋白质合成后的修饰 1.蛋白质刚刚被合成时，都以fMet（原核）或Met（真核）开始，无论是原核生物还是真核生物，N端的甲硫氨酸往往在多肽链合成完毕之前就被切除。有些动物病毒的mRNA可以翻译成很长的多肽链，经蛋白酶在特定位置水解后可得到几个有功能的蛋白。? 2.切除信号肽。许多蛋白质都带有15-30个残基的signal peptides，负责指导蛋白质在细胞中的精确定位。 3.二硫键的形成 4.特定氨基酸的修饰。 羧基化 磷酸化 γ-羧基谷氨酸 甲基赖氨酸 二甲基赖氨酸 三甲基赖氨酸 甲基谷氨酸 甲基化 氨基酸的糖基化 表5-4 5.切除新生肽链中的非功能区段 前胰岛素原 胰岛素原 胰岛素 切除信号肽 二硫键形成，切除C肽 -S-S- -S-S- ?-S-S- ? A C -S-S- -S-S- ?-S-S- ? A C APEPEPAPEPEAEADAEADPEAGIGAVLKVLTTGLPALISWIKRKRQQG 蜂毒蛋白只有经过蛋白酶水解切除N端的22个氨基酸以后才具有生物活性 该胞外蛋白酶只能特异性切割X-Y 2肽，其中X是丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸，Y是丙氨酸或脯氨酸。 6. 蛋白质的折叠 一、概述： （一）蛋白质转运的类型： 1、共翻译转运（翻译运转同步机制）： 蛋白质在结合核糖体上合成，蛋白质的合成和运转是同时发生的（如分泌蛋白质的转运） 2、翻译后转运（翻译后运转机制）： 蛋白质在游离核糖体上合成，合成完毕从核糖体上释放后才发生运转（如线粒体、叶绿体蛋白） 九、蛋白质的运输和降解 （二）翻译-转运同步机制 绝大部分被运入ER内腔的蛋白质都带有一个Signal peptide。该序列常常位于蛋白质的氨基末端，长度一般在13-36个残基之间，有三个特点： （1）一般带有10-15个疏水氨基酸； （2）常常在靠近该序列N-端疏水氨基酸区上游带有1个或数个带正电荷的氨基酸； （3）在其C-末端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸，离切割位点最近的那个氨基酸往往带有很短的侧链（Ala或Gly）。 信号肽：引导新合成肽链转移到内质网的一段多肽。 研究发现，信号肽把Ribosome牵引到ER上。蛋白质合成之初，一旦信号肽序列的N端暴露在核糖体外，该序列（包括核糖体）就迅速与SRP（signal recognition particle）相结合，诱发SRP与GTP相结合，停止新生肽的进一步延伸（此时新生肽一般长约70个残基左右）。 ??? 受位于ER外膜上的SRP-r