生物课件能力单元13 细菌的人工培养一般检验方法主要动物细菌_2.ppt

能力单元一（ 1-3） 细菌的人工培养一般检验方法 主要动物细菌  一 细菌的人工培养 ????? 培养基是人工配制的适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物营养基质。 根据培养基的用途来分 基础培养基：满足一般微生物生长繁殖所需要的营养物质。牛肉膏蛋白胨培养基是最常用的基础培养基。 营养培养基:在自然界中各种微生物通常是混杂在一起的，了解了某一些微生物的营养要求，配制适合这种微生物生长而不适合其他微生物生长的培养基，就达到了从自然界中分离这种微生物的目的，这种培养基就称为营养培养基。一般常加入血、血清或动植物提取液等。－－－－“投其所好” 选择性培养基:根据不同的微生物对营养的特殊要求,或对物理化学条件的抗性而设计的培养基,利用这一类培养基可以把需要微生物从混杂的其他微生物分离和确定。 －－－－“取其所抗” 鉴别培养基:在培养基中加入某种特殊化学物质,某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物,而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应,产生明显的特征性变化,根据这种特征性变化,可将该种微生物与其他微生物区分开来。 根据培养基物理状态分 1、液体培养基:配制后不加任何凝固剂。 2、半固体培养基:在液体培养基上加进一定凝固剂,在液体培养基中如加0.5%琼脂,可以用来观察细胞运动的特征,鉴定菌种,测定抗菌素的效价等。 3、固体培养基:在液体培养基中加入凝固剂(如1.5-2.0%琼脂)。固体培养基为微生物的生长提供了一个营养表面,在这个表面生长微生物可形成单个菌落,用于微生物的分离,鉴定,计数,保管。 菌落：细菌在固体培养基上定点繁殖时，形成孤立的、肉眼可见的堆积物。表现：大小、形态、透明度、隆起度、度、湿润度，表面光滑、粗糙、有无光泽。菌苔：许多菌落融合成一片。1、有丰富的营养物质2、PH、水分3、均匀透明，易于观察。4、经过灭菌和无菌检验 菌落形态 1、倾注平皿接种法：做好平皿（带有培养基）将少量液体在待检材料中加入灭菌平皿中，均匀放入培养箱培养。例如：用于鲜奶、饮水、尿液。2、平板划线培养法：无菌操作，用灭过菌的接种环取少量材料，然后在琼脂平板培养基表面划线。3、斜面接种法：用灭过菌的接种环将菌体材料接种于琼脂斜面上使其生长。例如：移植细菌、保存菌种。4、穿刺接种法：用灭过菌的接种针挑取少量菌落或液体培养基，于中心穿入，距底零点3厘米-0.5厘米时，将针原路退出。例如：半固体培养基接种，5、液体培养基接种法：用接种环取材料，插入盛有液体培养基的试管中二至三次摇动。 二 细菌的一般检验方法 三 主要病原细菌 1、葡萄球菌：G+ （1）形态：呈球形，排列成堆，如葡萄状，无鞭毛、芽胞。 金黄色葡萄球菌 、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。 （2）培养：在普通培养基上产生金黄色色素，致病性葡萄球菌在血液琼脂平板上形成明显的溶血环，MR试验阳性，致病性的葡萄球菌在厌氧条件下能分解甘露醇产酸。 （3） 致病性与抵抗力 致病力主要是毒素和酶,所致的疾病为畜禽的化脓性疾病，如：创伤感染、脓肿、皮炎、乳房炎、败血症等。 抵抗力是在不形成芽胞的细菌中是最强的，80℃30分钟才被杀死，碳酸效果最好。 对青霉素、庆大霉素高度敏感。耐药菌株逐年增多。 （4）检查：根据病型采集病料，如取血液，乳汁，脓汁等 直接镜检： 分离培养与鉴定：血液琼脂平板，有无溶血，菌落的颜色，甘露醇发酵试验。  2、链球菌：G+  （1）形态：球形、卵圆形，呈链状排列，无芽胞、鞭毛， （2）培养 根据链球菌在血液琼脂平板上的溶血现象分为三类： 1、甲型（α）溶血性链球菌：菌落周围有1～2毫米的草绿色溶血环，本类型致病力较弱。 2、乙型（β）溶血性链球菌：菌落周围形成2～4毫米的透明溶血环，致病力强。 3、丙型（r）链球菌：无溶血环，无致病性。 根据抗原构造分类：将乙型（β）溶血性链球菌分19个血清群。 （4）检查 根据不同的疾病，采集相应的病料，如取血液，乳汁，脓汁、渗出物等。 1、直接涂片镜检：链状排列的球菌。 分离培养：病料接种于血液琼脂平板。 链球菌的检验方法  3 、多杀性巴氏杆菌G-（1）形态：球杆菌，不形成芽胞，鞭毛，病畜的血液涂片或组织触片经美蓝或瑞氏染色呈两级浓染。 （2）培养 在普通培养基上生长不旺盛，在加有血液或血清琼脂培养基上生长良好，培养24h形成灰白色、湿润、边缘整齐、表面光滑闪亮的露珠状小菌落。无溶血现象。 （3）致病性与抵抗力 根据血清培养基上形成的菌落，可以分Fg型：对猪、牛、羊为强菌，对禽类毒力弱