核酸化学一节 概述.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 一、种类 1、根据底物分类 DNase、RNase； 单链核酸酶、双链核酸酶、杂合双链核酸酶 2、根据催化部位分类：外切核酸酶和内切核酸酶 外切酶：5′端→3′端或3′端→5′端核酸外切酶。 内切酶：限制性核酸内切酶和非限制性核酸内切酶。 限制性核酸内切酶(restriction endonucleases)：能够识别DNA分子的特定核苷酸序列，并在识别位点或其周围断开DNA双链的一类核酸酶 . 参与DNA的合成与修复及RNA合成后的剪接等重要基因复制和基因表达过程 ; 负责清除多余的、结构和功能异常的核酸，同时也可以清除侵入细胞的外源性核酸 ; 在消化液中降解食物中的核酸以利吸收; 体外重组DNA技术中的重要工具酶 . 生物体内的核酸酶负责细胞内外催化核酸的降解 二、核酸酶的功能 三、核 酶 催化性DNA (DNAzyme) 人工合成的寡聚脱氧核苷酸片段，也能序列特异性降解RNA。 催化性RNA (ribozyme) 作为序列特异性的核酸内切酶降解mRNA。 核酶作用： 1.核苷酸转移作用。 2.水解反应，即磷酸二酯酶作用。 3.磷酸转移反应，类似磷酸转移酶作用。 4.脱磷酸作用，即酸性磷酸酶作用。 5.RNA内切反应，即RNA限制性内切酶作用。 核酶的生物学意义： 1. RNA为生物催化剂，具有重要生物学意义。 2.打破了酶是蛋白质的传统观念。 3.在生命起源问题上，为先有核酸提供了依据。 4.为治疗破坏有害基因，肿瘤等疾病提供手段。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * tRNA的三级结构—倒“L”型 反密码子环 * tRNA的功能：活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。 tRNA小结 1、分子较小，含较多的稀有碱基和非标准碱基配对 2、5’端一般为鸟嘌呤核苷酸，3’端为CCA-OH3’。 3、二级结构为“三叶草”型（cloverleaf pattern） 反密码环：反密码环中部的三个碱基可以与mRNA的三联体密码形成碱基互补配对，解读遗传密码，称为反密码子（anticodon）。 次黄嘌呤I常出现于反密码子中。 氨基酸臂：3`末端的CCA-OH3`单链用于连接该tRNA转运的氨基酸。 二氢尿嘧啶环（DHU）：识别氨酰-tRNA合成酶 TΨC环：识别核蛋白体（核糖体） 4、“倒L”型三级结构 ACC DHU环 T?环 反密码环 5’ 额外环 （三）rRNA的结构与功能 核蛋白体的组成 原核生物（以大肠杆菌为例） 真核生物（以小鼠肝为例） 小亚基 30S 40S rRNA 16S 1542个核苷酸 18S 1874个核苷酸 蛋白质 21种 占总重量的40% 33种 占总重量的50% 大亚基 50S 60S rRNA 23S 5S 2940个核苷酸 120个核苷酸 28S 5.85S 5S 4718个核苷酸 160个核苷酸 120个核苷酸 蛋白质 31种 占总重量的30% 49种 占总重量的35% 16S rRNA 5S rRNA 23S rRNA 30S subunit 50S subunit 70S prokaryotic ribosome 18S rRNA 5S rRNA 28S rRNA 5.8S rRNA 40S subunit 60S subunit 80S eukaryotic ribosome Prokaryotic Eukaryotic L2 L3 L32 S1 S2 S3 S21 L1 32 proteins of large subunit (L1 ~ L32) 21 proteins of small subunit (S1 ~ S21) L2 L3 L50 S1 S2 S3 S33 L1 50 proteins of large subunit (L1 ~ L50) 33 proteins of small subunit (S1 ~ S33) rRNA的分子结构 特征：?单链，螺旋化程度较tRNA低 ?与蛋白质组成核糖体后方能发挥其功能，作为蛋白质合成的场所 5sRNA的二级结构 核糖核酸 （RNA）： 脱氧核糖核酸（DNA）： m RNA t RNA r RNA （信使 RNA ） （转运 RNA ） （核蛋白体 RNA） 细胞质，参与蛋白质的生物合成 5 %，Pr合成的直接模板 15 %，活化与转运