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常用仪器分析汇报ppt课件
仪器分析汇报;红外光谱分析
流式细胞仪
激光扫描共聚焦显微镜
动态光散射仪
核磁共振波谱分析
;红外光谱分析(IR);;近红外光谱区:
低能电子能级跃迁
含氢原子团:-OH、-NH、-CH伸缩振动的倍频吸收峰
稀土及过渡金属离子配位化学的研究对象
适用于水、醇、高分子化合物、含氢原子团化合物的定量分析
中红外光谱区:
分子的振动、转动基频吸收光谱区
应用最为广泛的红外光谱区
;远红外光谱区:
气体分子的转动能级跃迁
液体与固体中重原子的伸缩振动
晶体的晶格振动
某些变角振动、骨架振动-异构体的研究
金属有机化合物、氢键、吸附现象研究
该光区能量弱,较少用于分析
;红外光谱的应用及特点: ;色散型红外光谱仪;产生红外吸收的条件;峰数目——分子的振动自由度;吸收峰数目少于振动自由度的原因:;吸收峰的位置及影响因素;电子效应:诱导效应、吸电效应;使吸收峰向高波数方向移动(蓝移)
共轭效应:n-?共轭效应(中介效应),?-?共轭效应(C效应);使吸收峰向低波数方向移动(红移)
氢键效应:分子内氢键、分子间氢键;使吸收峰向低波数方向移动(红移)
振动耦合:当两个振动频率相同或相近的基团相邻并由同一原子相连时,两个振动相互作用产生共振,吸收谱带裂分,形成双峰(高频和低频)。
;费米共振:当一振动的倍频与另一振动的基频接近(2νA= ν B)时,二个振动相互作用而产生强吸收峰或者发生谱带裂分的现象。
空间效应:由于空间阻隔,分子平面与双键不在同一平面,此时共轭效应下降,吸收峰蓝移。
张力效应:环张力:四元环 五元环 六元环;环外双键随环张力增加,吸收峰蓝移。环内双键随环张力增加,吸收峰红移
物质状态:由固态向气态转变时,其红外吸收峰将蓝移。
溶剂效应:极性基团的伸缩振动峰随溶剂极性增加而红移。
;特征区与指纹区 ;;流式细胞仪(FCM);FCM与其他细胞分析技术相比,有如下特点:
高速度:每秒可检测1 000~5 000个细胞。
高灵敏度:每个细胞只要带有1 000~3 000个荧光分子就能检出,两个细胞之间有5%的差别就可区分出来,光散射的灵敏度为0.3um。
高精度:在细胞悬液中测量细胞,比其他分析技术的变异系数更小,分辨率高。
高纯度:分选细胞的纯度可大于99%以上。
多参数:可同时定量检测单个细胞的DNA等多个参数。
在适当的条件,可对活细胞进行无害性分析和分选。
;流式细胞仪基本结构;流式细胞仪基本原理;流式细胞术光信号;;细胞信号的显示;;;; 直方图 散点图 假三维图;流式细胞仪的使用;流式对照的设置;激光扫描共聚焦显微镜(LSCM);激光扫描共聚焦显微镜的基本结构;激光扫描共聚焦显微镜的基本原理;共聚焦显微镜与传统显微镜的区别;抑制图像的模糊,获得清晰的图像
具有更高的轴向分辨率,并可获取连续光学切片
增加侧向分辨率
由于点对点扫描去除了杂散光的影响;激光扫描共聚焦显微镜的优越性;荧光样品的制备要求;激光扫描共聚焦显微镜的应用;动态光散射仪;动态光散射仪原理;;从扩散系数获得粒度;;动态光散射技术的优点:;核磁共振波谱分析(NMR);核磁共振的原理;原子序数;对于具有一定自旋量子数I、磁量子数m的核量子化能级的能量为:
H0 :外加磁场强度 β :核磁子 μ :核磁矩
相邻两个能级的能量差:
当用频率为υ的电磁波照射被外磁场分裂了的自旋1H核且满足:
1H核自旋产生的磁场与外磁场发生相互作用,磁矩的取向发生改变,即处于低能态的核吸收了射频能量而跃迁至高能态,发生了核磁共振吸收。
;;原子核在自旋的同时,还以外磁场方向为轴线发生回旋,这种回旋运动称为拉摩尔进动:
ω0自旋角速度 υ0进动线频率 γ磁旋比
当电磁波的照射频率υ与进动频率υ0相等时,
发生核磁共振吸收,核磁矩取向发生改变。
;;固定磁场,改变射频频率,扫频法,较困难
固定射频频率,改变磁场,扫场法,通常用
;脉冲傅里叶变换核磁共振波谱仪;样品的制备;化学位移;1H NMR谱;
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