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人感染H7N9禽流感样本采集课件
主要内容
采样准备
采集样本种类
样本采集方法
样本包装及运输
样本的保存
样本的转运
(一)采样准备
1.样品采集包
止血带、真空采血管及采血针、酒精、碘酒、废物收集瓶、样品转运瓶、镊子、剪子、采集咽拭子、压舌板、10ml螺口收集瓶、50ml螺口收集瓶、火柴、棉花、塑封袋、样品识别标签、样品移液器及枪头、载玻片、油性记号笔、碳素笔、样品采集登记本等
2.样品转运包
①样品转运箱
②-95kPa样品密封袋
③带螺口硬壁样品转运瓶
④吸水性填充物
⑤软性填充物
⑥冰排
3.采样时二级生物安全防护
着装顺序:内防护服、帽子、N95口罩、第一层手套、外防护服、防护眼镜、胶靴、每二层手套
卸装顺序:脱第一层手套、防护眼镜、外防护服、脱胶靴、摘口罩、帽子、内防护服、第二层手套
二级防护示意图
戴口罩的程序
卫生部:医院隔离技术规范,2009
1. 穿过口罩带托起口罩
2. 罩住口鼻
3. 固定颈部口罩带
4. 固定头部口罩带
5. 固定鼻夹
6.密合测试
(二)采集标本种类
1.上呼吸道标本:包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液
2.下呼吸道标本:如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本
3.血清标本:采集急性期、恢复期双份血清,发病7天内急性期血清以及间隔2-4 周的恢复期血清
4.尸检标本:肺组织、气管、支气管组织标本
应当尽量采集病例发病早期的标本
(三)标本采集方法
1.咽拭子:将棉签浸入病毒保存液中取出,用2根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将拭子头浸入含3ml病毒保存液的管中,尾部弃去,旋紧管盖。
2.鼻拭子:将1根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。取另一根聚丙烯纤维头的
塑料杆拭子以同样的方
法采集另一侧鼻孔。上
述两根拭子浸入同一含
3ml采样液的管中,尾部弃去,旋紧管盖。
3.鼻咽气管抽取物:用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。
将收集器头部插入鼻腔或气管,接通负压,旋转收集器头部并缓慢退出,收集抽取的粘液,并用3ml采样液冲洗收集器1次(亦可用小孩导尿管接在50ml注射器上来替代收集器)。
4.咽漱液:用10ml不含抗菌素的采样液漱口。漱口时让患者头部微后仰,发“噢”声,让洗液在咽部转动。然后将咽漱液收集于50ml无菌的螺口塑料管中。无条件的可用平皿或烧杯收集咽漱液并转入10ml螺口采样管中。(建议使用螺口采样管)
5.呼吸道灌洗液:将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管(约30cm深处),注入5ml生理盐水,接通负压,旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的粘液,并用采样液涮洗收集器1次(亦可用小孩导尿管接在50ml注射器上来替代收集)。
6.肺组织活检标本:在超声或X线定位下,经皮穿刺取肺组织活检标本,置于含3ml采样液的塑料螺口管中。
7.血清标本:用真空负压采血管采集血液标本5ml,室温静置30分钟,1500~2000rpm离心10分钟,收集血清于2ml无菌螺口塑料管中。
8.尸检标本:每一采集部位分别使用不同消毒器械,以防交叉污染;每种组织应多部位取材,各部位应取20~50g,淋巴结取2个。
(四)样本的包装及运送
1.样本标识 标本标签内容应齐全
①原始采样容器上应注明患者姓名、编号、标本性质、采样日期。
②一层包装包括标本种类、标本数量、运送人和接受人及其包装日期、运输日期。
③二层包装包括标本种类、标本数量、运送人和接受人及其包装日期、运输日期。
④三层包装包括收样单位、详细地址、联系人、 联系电话。
2.包装 标准的包装方法和材料应能确保即使在运送中包装意外受损时也能保护人员的安全及标本的完整。
①将采集的标本用软性添充物裹好放入到-95kPa专用密封袋中,密封袋上贴标签。
②将密封袋用软性添充物裹好放入到硬壁带螺旋口的专用容器中,贴好标签。
③将硬壁容器放入一次性泡沫箱中,放好冰排,密封送检,箱体贴好标签。
3.运送 病例的标本采集后,应由专人专车在24小时内送到当地流感监测网络实验室进行检测。
(五)样本的保存
1.用于病毒分离和核酸检测的标本应尽快进行检测。
2.24小时内能检测的标本可置于4℃保存,24小时内无法检测的标本则应置于-70℃或以下保存。-20℃冰箱暂存。血清可在4℃存放3天
3.标本运送期间应避免反复冻融。标本应设立专库或专柜单独保存。
六、样本的运送
1 上送标本
检测结果阳性或可疑的原始标本及分离物应及时送中国家疾病预防控制中心复核和进一步检测
2 标本运送的生物安全要求
H7N9禽流感病毒实验室活动和样本运输按照《人间传染的病原微生物名录》中
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