目视LAMP技术对人乳头瘤病毒18亚型检测应用价值研究.docVIP

目视LAMP技术对人乳头瘤病毒18亚型检测应用价值研究 　　[摘要] 目的 探讨环介导等温扩增技术用于检测临床标本乳头瘤病毒HPV18亚型的应用价值。 方法 设计针对HPV18-L1 基因序列中6个区段的4条特异引物，在等温条件下（65℃）进行核酸扩增反应1h，在扩增前加入钙黄绿素作为反应指示剂；利用建立的环介导等温扩增方法进行敏感型检测以及检测正常体检妇女和患者子宫颈分泌物的HPV18亚型。 结果 LAMP检测HPV18 L1基因的敏感度为1000拷贝每微升；阴道炎患者HPV18阳性检出率为5.26%（1/19）；慢性子宫颈炎组HPV18亚型检出率为10%（2/20）；宫颈上皮内瘤变（CINⅠ ～Ⅱ级）阳性检出率33.3%（3/9）；子宫颈癌Ⅰ级阳性检出率为64%（16/25）。 结论 基于目视的环介导等温扩增方法是一种具有经济、快速筛查临床标本中HPV18亚型的诊断工具，可具有在基层医院推广应用的潜能。 　　[关键词] 人乳头瘤病毒；核酸；环介导等温扩增试验 　　[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）18-09-03 　　在妇科恶性肿瘤中，子宫颈癌是仅次于乳腺癌的威胁妇女健康的第二杀手。全球每年大约有47万妇女罹患宫颈癌[1]。HPV病毒几乎在所有子宫颈癌病例中都存在，是引发子宫颈癌的元凶[2]。临床上用于检测