细胞凝集试验实验讲义.docVIP

细胞凝集反应 一、实验目的 了解细胞膜的结构与功能。 二、实验原理 细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状外被。目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。 凝集素(lectin)是一类含糖(少数例外)的并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 三、实验用品 土豆块茎 显微镜、粗天平、载玻片、滴管2支、离心管2支。 PBS缓冲液 NaCl 7.2g Na2HPO4 1.48g KH2PO4 0.43g H2O 1000ml 2％的红细胞 四、实验步骤 1、2％的红细胞的制备： 取一定量的红细胞，用生理盐水洗5次，每次2000r/min，离心5min，最后按压积红细胞体积用生理盐水配成2％红细胞液。 2、称取去皮土豆块茎2g，加10mlPBS缓冲液，浸泡2h，浸提液中含有可溶性淀粉土豆凝集素。 3、用滴管吸取土豆凝集素和2％红细胞液各一滴，置于载玻片上，充分混匀，静置20min后，于倒置显微镜下观察血球凝集现象。 4、以PBS液加2％血细胞液作对照实验。 五、实验报告： 简图表示血细胞凝集原理。 细胞膜的渗透性 一、实验目的 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。 二、实验原理 将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的溶质不能渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压，所以水分进入细胞，引起溶血，溶质渗入速度不同，因此溶血时间也不同。 三、实验材料和试剂 器材：50ml小烧杯，10ml移液管，试管，试管架。 2、材料：动物血液 3、试剂： 0.17mol/L氯化钠、0.17mol/L氯化铵、0.17mol/L醋酸铵、 0.17mol/L硝酸钠 0.12mol/L草酸铵和0.12mol/L硫酸钠 0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L甘油、0.32mol/L乙醇和0.32mol/L丙酮 四、实验方法 1、动物血液的稀释：取1份血液，加入10份0.17mol/L氯化钠溶液即可。 2、低渗溶液：取试管一支，加入10ml蒸馏水，再加入1ml稀释的血液，注意观察溶液颜色的变化，由不透明的红色逐渐澄清，说明红细胞发生破裂造成100％红细胞溶血，使光线比较容易透过溶液。 3、红细胞的渗透性： 取试管一支，加入0.17mol/L氯化钠溶液10ml，再加入1ml稀释的血液，并轻轻摇动，注意颜色有无变化？有无溶血现象？为什么？ 取试管一支，加入0.17mol/L氯化铵溶液10ml，再加入1ml稀释的血液，并轻轻摇动，注意颜色有无变化？有无溶血现象？若发生溶血，记下时间(自加入稀释血液到溶液变成红色透明澄清所需时间)。 分别在另外几种溶液中进行同样的实验。步骤同上。 五、实验结果讨论与分析 将观察倒的现象列入下表，对实验结果进行比较和分析。 试管编号 是否溶血 时间 结果分析 1.10mlNaCl＋1ml稀释血液 2. 10mlNHCl＋1ml稀释血液 3. 10mlNHAc＋1ml稀释血液 4. 10mlNaNO3＋1ml稀释血液 5. 10ml草酸铵＋1ml稀释血液 6. 10mlNa2SO4＋1ml稀释血液 7. 10ml葡萄糖＋1ml稀释血液 8. 10ml甘油＋1ml稀释血液 9. 10ml乙醇＋1ml稀释血液 10. 10ml丙酮＋1ml稀释血液 果蝇的饲养与形态观察 果蝇简介 果蝇是在世界各地常见的昆虫，属于昆虫纲，双翅目，果蝇科，果蝇属。果蝇属有3000多种，我国已经发现800多种，遗传学研究中通常用的是黑腹果蝇。作为遗传学研究的材料，果蝇具有非常突出的优点，它形体小，生长周期迅速，繁殖率高，饲养方便，世代周期短，约12天就可繁殖一代，突变性状多，染色体数目少，基因组小，实验处理十分方便，容易重复实验，便于观察和分析。果蝇的遗传学研究广泛而深入，尤其在基因分离、连锁、互换等方面十分突出，为遗传学的发展作出了突出的贡献。目前果蝇仍然是遗传学、细胞生物学、分子生物学、发育生物学等研究中常用的模式动物。 实验目的 1.掌握果蝇的基本特征及鉴别雌雄果蝇的方法，熟悉常见突变型。 2.了解果蝇生活周期特征及各阶段的形态变化。 实验材料 实验用品