抗生素类药物的分析课件_1.pptVIP

一、概述： 抗生素类药物的特点： 结构较复杂，可能含有较多杂质 种类多，结构各异 多数抗生素不稳定，易分解 鉴别试验和含量测定可有理化方法、生物学方法、两者并存 抗生素类药物的种类： ?-内酰胺类抗生素 氨基糖苷类抗生素 四环素类抗生素 氯霉素类抗生素 大环内酯类抗生素 其他类抗生素 效价测定：抗生素的含量测定方法，主要为微生物学法和化学及物理化学法两大类。 微生物学法 是以抗生素的抑菌或杀菌能力作为衡量效价的标准。其原理与临床应用的要求一致，有利于确定抗生素的医疗价值。对已知分子结构或结构不明确的抗生素均能应用。对同一类型的抗生素不需分离，可一次测定其总效价。但该法操作繁琐，测定时间长，误差较大。 理化分析法 对于提纯的、化学结构已确定的抗生素，可用化学及物理化学方法测定。本类方法是根据抗生素的化学结构特点，利用其特有的物理化性质而进行的。因是利用某一类抗生素的共同结构的反应，其测定结果往往只能代表总的含量，不一定能代表某一抗生素的生物效价。只有当本法的测定结果与生物效价相吻合时，才能用于效价测定。该法操作简便、省时、方法准确，并具有一定的专属性。 重点： ?-内酰胺类抗生素:含量测定 氨基糖苷类抗生素：药物的鉴别 四环素类抗生素:降解产物（即不稳定性）。 二、β－内酰胺类抗生素 本类抗生素包括青霉素类和头孢菌素类，分子结构中都含有β-内酰胺环，故统称为β-内酰胺类抗生素。 结构与性质: 酸性（游离的羧基） 旋光性（手性碳原子） 紫外吸收特征 β-内酰胺环的不稳定性 eg：青霉素 青霉噻唑酸 青霉酸 α-青霉噻唑酰基羟胺酸 青霉烯酸 鉴别反应: 钾、钠盐的焰火反应： 含有钾盐或钠盐可利用其焰火反应进行此类药物的鉴别。 呈色反应: 沉淀反应: 光谱法 呈色反应: 羟肟酸铁反应——β－内酰胺 硫酸－硝酸呈色反应——头孢菌素 茚三酮反应——α－氨基 与斐林试剂反应——类似肽键结构 变色酸－硫酸呈色反应 与重氮苯磺酸呈色反应 与铜盐呈色反应——头孢氨苄专属反应 沉淀反应： 在稀盐酸中生成白色沉淀 有机胺盐的特殊反应 1)重氮化-偶合反应：普鲁卡因青霉素水溶液酸化后，游离出的芳伯胺基，显重氮化-偶合反应，生成偶氮染料的红色沉淀 2)三硝基苯酚反应 光谱法： 紫外吸收分光光度法 1）最大吸收波长鉴别法 2）水解产物的最大吸收波长鉴别法 红外光谱法 核磁共振光谱 含量测定:(重点) 酸碱滴定法 碘量法 汞量法 紫外分光光度法 酸碱滴定法: 原理：青霉素或头孢菌素的β-内酰胺环被稀碱水解，例如青霉素生成青霉噻唑酸衍生物。此步水解系定量完成，可用于含量测定。在水解前，将供试品溶液的pH调至约为8，加入定量而过量的碱，在一定温度和时间反应后，剩余的碱用标准酸液滴定至pH约为8，根据消耗的碱量计算青霉素的含量。 注意：二氧化碳的干扰 ？调节PH值到8？？ 碘量法: 原理：青霉素或头孢菌素分子不消耗碘，但用碱水解生成的降解产物可被碘氧化，从而消耗碘。青霉素类抗生素经碱水解的产物青霉噻唑酸，在酸性条件下被碘氧化，根据消耗的碘量可计算药物的含量。 说明：1mol青霉素相当于8mol碘原子。反应的摩尔比为1：8。碘与青霉噻唑酸作用时，溶液的pH在4.5左右最好。 本法的空白试验?? 汞量法： 原理：青霉素分子不与汞盐反应，而其降解产物能与汞盐定量反应。在碱性条件下青霉素的水解产物青霉噻唑酸进一步水解成青霉胺，能与汞盐定量反应，根据消耗汞盐的量可以计算青霉素的含量。青霉素分子中的氢化噻唑环含有一个硫原子，开环后形成巯基，用汞盐滴定巯基化合物。 空白试验是取供试品溶液，不经碱水解，其余同法操作，作为对照，目的是消除供试品中可能存在的降解产物的干扰。 紫外分光光度法: 酸水解法(铜盐法)：青霉素类抗生素在弱酸性下的降解产物青霉烯酸，具有紫外特征吸收。 硫醇汞盐法：青霉素在咪唑催化下于氯化汞（0.001mol/L）的中性溶液（pH6.8）中，在60℃能定量地形成稳定的青霉烯酸硫醇汞盐，在325~345nm处有最大吸收。 三、氨基糖苷类抗生素 结构和性质： 碱性 水解性 氧化还原性 鉴别试验:(重点) 茚三酮反应 N-甲基葡萄糖胺反应 麦芽酚反应（重点） 坂口反应（重点） 茚三酮反应 链霉素和庆大霉素分子具有氨基糖苷结构，所以具有羟基胺类和α-氨基酸的性质，可与茚三酮缩合成蓝紫色缩合物。 N-甲基葡萄糖胺反应 链霉素和庆大霉素经水解，产生N-甲基葡萄糖胺，在碱性溶液中N-甲基葡萄糖胺与乙酰丙酮反应，形成吡咯衍生物，再与对二甲氨基苯甲醛在酸性醇溶液中生成