2010w05微生物的生长繁殖与生存因子.ppt

提问：青霉菌与其周围细菌的关系是什么？ 拮抗 此处没有细菌 细菌菌落 青霉 ？ 捕食——两种微生物生存在同一环境中时，甲微生物吞食乙微生物。 例证：原生动物与细菌、真菌等 提问：原生动物与细菌间关系？ 捕食 寄生——两种微生物生存在同一环境中时，甲微生物寄生在乙微生物内从而获得营养。（一方生活在另一方体内) 例证：噬菌体与细菌;某些真菌与真菌；冬虫夏草 寄生关系 冬虫夏草，是子囊菌寄生于鳞翅目幼虫而形成的。 冬季，虫体蛰伏在土中，真菌孢子侵入虫体，并生长发育，使虫体内充满菌丝，幼虫死亡。来年温暖潮湿时，自幼虫的头部长出棒状子实体露出土面，形似野草，故谓“冬虫夏草”。 思考：综合分析一下活性污泥中各种生物内部及之间的相互关系即对水处理效果的影响？ 这些关系是否是变化的？ 一. 微生物的选育 选育—筛选与定向培育 筛选—“众里挑一” 定向培育—“教育培训” 定向培育在水的生物处理俗称驯化。 第五节菌种选育、退化、复壮与保藏 1.微生物的筛选方法 原理：优胜劣汰 方式：选择性培养基（天然+人工） 天然——特殊区域采样 例如 筛选能降解石油的细菌？ 收集长期被石油污染的土壤(天然选择性固体培养基），必有适应石油环境利用石油作为食物的细菌，将土壤样品在实验室用石油降解菌选择性培养基，对样品中的石油降解菌进行进一步的选择培养，筛选分离，富集，为下一步的驯化工作奠定基础。　 驯化 选择性培养基（石油）浓度升高 筛选分离 2 3、4 1 4 小考 1 中考 高考 2.细菌的驯化 ①渐变－诱导法(休眠的酶基因复活+自然突变) 方法： 待降解物通常为有机毒物或惰性物。 5 6 7 N 选择性培养基（待降解物，如石油）浓度升高 5 n N+1 死 筛选与诱导驯化可以同时进行 特点:操作简便，驯化的潜力有限，慢。 结果 诱变剂：温度、紫外线、核辐射、酸、碱、化学诱变剂等等。 ②突变—诱变法 提问：哪些因素可以引起基因突变呢？ 提问： 基因突变的分子机制？ DNA碱基丢失、增多、错配等 点突变→染色体畸变 基因突变有这样几个特点。 常用的诱变剂：紫外线、5—溴尿嘧啶、亚硝酸、亚硝基胍、卟啶染料等。 诱变的步骤 Ⅰ.制出发菌株的单细菌悬浮液 提问：为什么？如何在整个过程中尽量使细菌分散呢？ 诱变剂与细菌充分接触；向细菌培养液中加入玻璃珠，并保持在诱变过程中始终进行振荡搅拌形成出发细菌的单细菌悬浮液； B．方法 Ⅱ.选择合适的诱变剂剂量进行诱变 提问：为什么要有剂量限制呢？ 少,效率低;过高“是药三分毒” 会造成细菌大量死亡。 例如在进行细菌紫外诱变时，通常使用15或20W的紫外灯距离细菌单细菌悬浮液15~30cm，照射15~20min。 Ⅲ.筛选突变出的高效菌 提问：如何筛？ 选择性培养基 评价 诱变法潜力要远大于诱导法，但操作复杂。在实际诱变中，往往要经过多次不同诱变方法的诱变处理以及大量繁琐的筛选分离工作才有可能获得理想的突变体。最后这些突变体将会在实验室小试、中试的基础上被投放到生产实践中。 参见 《环境微生物学技术手册》（图书馆X172-6201） 通常生产上更多利用的是诱导法。 污泥培养初期逐步提高污水比例，有些菌种不能适应被淘汰(筛选)，能产生诱导酶的菌株及自发突变体中能来降解此类废水的菌种能够生存而被保留下来，且能力逐步提高，使废水达到预期的排放标准； *诱变菌株环保市场的开发前景如何?目前国内外有哪些主要的此类公司? ③基因重组法 不同个体基因重新组合 A．形式 自发基因重组与人工基因重组 自发基因重组 a. 真 核 生 物 为 杂 交； 精卵细胞质融合过程中所有遗传物质的重组 b. 原 核 生 物 为 转 化 、 转 导 、接合； 部分遗传物质的转移和重组 B.人工基因重组—遗传工程 遗传工程是70年代初发展起来的生物技术。 定义：对遗传物质进行改造（人工干预下的杂交、转化、接合、转导）的技术。 工程：类似工程设计那样有很高的预见性、精确性与严密性。 a.遗传工程的方法 遗传工程方法包括两个水平的研究：一种是细胞水平；另一种是基因水平。所以，又可把它分为细胞工程和基因工程。 细胞工程——两个细胞原生质体融合 体 外 切 割 导 入 遗 传 物 质 基 因 片 段 受 体 细 胞 基因工程——两个细胞DNA片段剪接拼接 狭义的讲，遗传工程就是基因工程。 原理：限制性核酸内切酶 b.遗传工程在环境工程中的应用 对特殊基因进行“剪切－粘贴－链接”制造“超级细菌” + + Ⅰ.降解石油的工程细菌 70年代美国