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细胞培养生产紫杉醇的系统生物技术 元英进 天 津 大 学 2009-08-12,昆明 84年 天津大学,学士；87硕士；91博士； 93年副教授，95年教授，96年任博导； 97年 教育部跨世纪优秀人才 99年人事部“百千万人才工程”第一、二层次； 00年-至今 历任化工学院副院长、院长; 02年 天津市“131”人才工程第一层次； 03年 天津市特聘教授； 04年 国家杰出青年基金获得者;天津市授衔专家 07年 国家教学名师 报告内容 紫杉醇的药源问题 蛋白质组研究 代谢组研究 合成生物学研究 紫杉醇原料来源 3) 半合成紫杉醇 侧链：化学合成； 细胞生长与紫杉醇合成 关系:非偶联 高产措施: 诱导子:稀土铈离子/真菌多糖/甲基茉莉酸 培养策略:前体饲喂/两相培养等 手段:测序技术革命,NMR,GC-MS,LC-MS,2DE-MS, 基因组 转录组 蛋白质组 代谢组 合成生物学（synthetic biology）是基于生命系统的工程技术，旨在设计、构建自然界不存在的生命或使已存在生命具有新功能。 合成生物学研究如何设计和构建人工生命，依靠人工开发的基因密码，按照预定的方式运行生命。 继人类基因组研究之后，生物领域一热门学科，是整体系统论生物学思潮在工程学领域的再现。 Synthetic biology vs computer assembly Production of paclitaxel Engineered E. coli for production of amorphadiene 4、 Engineered yeast for production of amorphadiene Engineered yeast for Taxol production Croteau RB, et al. Biotechnology and Bioengineering, 2006, 93:212-224 合成生物学 工程酵母细胞炼制工厂合成并向胞外分泌青蒿酸 青蒿二烯产量达153?mg/L,提高了500倍。 青蒿酸占酵母干重的4.5% 工程酵母发酵4－5天的生产能力为100?mg/L 其速度比从植物中提取要快将近100倍。 被评为2006年“世界十大科技进展之一”。 合成生物学的一个里程碑。 (a)得分图 (b)载荷图 PCA分析正常细胞和不同诱导子胁迫的诱导细胞 MeJA和Ce4+诱导东北红豆杉细胞磷脂酶的差异激活及下游脂质信号分子的信号转导模型 Yang S, Lu SH, Yuan YJ. BBA-Mol. Cell Biol. L.1781 (2008) 123–134 IF:3.539 诱导子作用下红豆杉细胞膜磷脂代谢信号转导 Phospholipidomics of Taxus cells responsing to shear stress Negative-ion LC/ESI/MS base peak chromatogram of phospholipids from Taxus cells 40 h after shear stress treatment. PG, phosphatidylglycerol; PE, phosphatidylethanolamine; PC, phosphatidylcholine; LysoPC, lysophosphatidylcholine. PA, phosphatidic acid; PI, phosphatidylinositol; PS, phosphatidylserine; Phospholipid contents in shear stress-induced Taxus cells. Score plots from PCA (A) and PLS (C). (B) Loading plot from PCA. (D) VIP plot from PLS. Multivariate analysis by PCA and PLS. LysoPC Changes of biomarker phospholipids PA P-P Han and Y-J Yuan. FASEB J. 2009 23: 623-630. Activation of phospholipase D Activation of phospholipase C Defining the enzymatic source of PA. Analysis of lipidomics of Taxus cells in response to shear stress Phospholipid contents in shear s