la- b-对β，α，β-三羟胆固醇诱导ecv-细胞凋亡影响及相关机理的研究.docx

独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到，本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于保密，在__不保密□。_年解密后适用本授权书。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日1绪论1.1引言动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS)是心血管疾病中最常见、最重要的一种，也是世界上死亡率较高的一种疾病，在我国及发达国家居于死亡原因的前三位，而且冠心病的发病与死亡率在我国某些地区正在上升[1]。血脂紊乱、高血压、吸烟、不良饮食习惯等都是引起动脉粥样硬化的因素。研究发现高胆固醇血症的人和动物的血浆、AS损伤的动脉壁及氧化型低密度脂蛋白（Ox-low density lipoprotein，Ox-LDL）中均含有大量氧化型胆固醇（Ch-Ox）；细胞培养实验也发现，Ch-Ox对与 AS形成有关的多种细胞（血管内皮细胞、平滑肌细胞、巨噬细胞等）具有明显的毒性作用[2]。这些实验结果提示 Ch-Ox可能与 AS的发生密切相关，甚至 Ox-LDL的毒性主要来自 Ch-Ox[3]，从而引起研究者对 Ch-Ox的重视。稀土具有广泛而独特的生物效应。总的来说，对于正常的细胞，稀土多表现为促进增殖和抑制凋亡的作用；而对于肿瘤细胞，稀土多表现为抑制增殖和促进凋亡的作用。低浓度的稀土多表现为促进增殖作用，高浓度的稀土多导致细胞凋亡。稀土对于细胞作用的两面性不仅和稀土的浓度有关，也和作用细胞类型有关。另外关于稀土对酶，蛋白质，核酸等重要生物大分子活性和结构的影响以及稀土的组织形态毒理学研究也有不少报导[4]。到目前为止，稀土生物学效应的作用机理都不清楚。稀土生物效应中对增殖和凋亡的影响成为长期被关注和争论的问题。此外，稀土的长期生物效应，尤其是否具有致突致畸能力，也是人们关注的热点。一系列的试验报道证实了稀土元素 La3+可以抑制 AS的发生和发展，其作用机理一般认为是由于 La的钙拮抗性[5]和抑制 ROS的产生[6]。本章将对 AS的发生发展及氧化型胆固醇在其中的作用及机理、稀土的生物效应及其与 AS的关系、细胞凋亡信号通路研究进展进行简要综述。11.2氧化型胆固醇和动脉粥样硬化1.2.1动脉粥样硬化的发生发展AS的发病机制至今尚未完全阐明，总结来说AS发病机理有以下几种：损伤反应学说[7]；单克隆平滑肌增生学说[8]；自身免疫学说[9]；炎症学说[10]和感染学说[11]等。动脉粥样硬化是指动脉某些部位内皮功能障碍，导致血浆中的脂质进入并积聚于内皮下间隙；同时，单核细胞与内皮细胞发生粘附并通过内皮细胞间隙跨过内皮进入内皮下，通过摄取被氧化修饰的LDL转化为巨噬细胞。巨噬细胞通过细胞膜上的清道夫受体摄入大量的脂质，成为泡沫细胞，积聚为脂质核心，AS斑块开始形成；另外平滑肌细胞增殖并向内膜方向迁移，也能摄入脂质转化成泡沫细胞。平滑肌细胞增殖使动脉壁变厚，并可纤维化形成纤维帽，AS斑块趋于成熟；纤维帽含致密的细胞外基质，包在脂质周围使富含致血栓性的脂核与循环血液分隔，保持斑块稳定[12]。当AS斑块经长期发生发展成熟后，因其体积增大而堵塞动脉管腔，或因表面破裂而致血栓形成造成堵塞，造成该血管支配部位的缺血、梗塞，再通后又会引起缺血-再灌注损伤。高胆固醇血症，特别是其中的低密度脂蛋白（LDL），是血管内皮细胞的主要损伤因素之一[13]。高胆固醇血症可导致低密度脂质沉积，从而趋化巨噬细胞聚集，导致泡沫细胞的形成；而巨噬细胞在处理胆固醇的同时，释放了大量的炎症因子，还可进一步趋化更多的炎症细胞聚集到周围，从而开始了整个AS的炎症过程[14]。高胆固醇血症可使内皮细胞黏附因子的表达明显增加[15,16]，致使白细胞黏附和渗透增加，发生血小板-内皮细胞聚集以及增加内皮细胞的氧自由基[15]。炎症在受上述因素的共同作用后，聚集到斑块局部，通过贴壁，黏附，最终穿越血管内皮细胞进入皮下。在此过程中，炎症细胞释放了大量的炎症因子，导致了粥样硬化斑块内部结构的改变，成为富含炎症介质的不稳定斑块，最终产生斑块的破裂，形成血管阻塞型病变。近年的研究结果表明，高胆固醇血症与氧化应激损伤密切相关，高胆固醇血症所