霍乱弧菌 实验室检验技术课件_1.pptVIP

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霍乱弧菌 实验室检验技术课件_1

项目三 弧菌 检验技术 一. 霍乱及其病原体的研究简史 ﹙一﹚霍乱概念: 霍乱(Cholera)是由O1血清群和O139血清群霍乱弧菌﹙Vibrio cholerae ﹚引起的急性肠道传染病﹙本病以腹泻大量水样便并拌有脱水症状为特征﹚,其发病急,传播快,波及范围广,可引起大流行。是国际检疫传染病之一,也是《中华人民共和国传染病防治法》规定的甲类传染病之一。 ﹙二﹚世界上霍乱的流行历史: 霍乱共流行七次,均为O1群霍乱弧菌引起。 前六次由 O1 群古典型霍乱弧菌引起,第七次由O1 群埃尔托型霍乱弧菌引起。 这七次大流行的年数依次是 7、12、18、11、14、25、12。 ﹙三﹚霍乱弧菌病原体的发现简史 1.古典型霍乱弧菌的发现 1883年第五次霍乱弧菌大流行,德国科学 家郭霍(Robeit Koch)在埃及用显微镜染色检 查法和培养法发现古典型霍乱弧菌。随后郭霍又 在埃及进行了大量的研究,1884年7月正式公布 了古典型霍乱弧菌的发现。 2 .埃尔托型霍乱弧菌的发现 第七次霍乱弧菌大流行之前1905年德国人戈奇利希﹙F.Gotschlicn﹚发现了埃尔托型霍乱弧菌。该菌引起第七次霍乱弧菌大流行﹙1961~1972﹚,至今世界各地分离的O1霍乱弧菌均为O1埃尔托型霍乱弧菌。 埃尔托型霍乱弧菌可在某些水生 动植物中生存如甲鱼、牛蛙等。例如 2002年在鲈鱼中、2003年、2004和 2005年均在甲鱼中发现霍乱弧菌。致 使水体成为霍乱弧菌的重要储存场所。 三、霍乱弧菌的形态学 (一)形态与染色 (二)菌细胞结构 1、细胞壁 :特异性多糖(O抗原) 2、细胞膜 3、细胞浆:质粒 4、核质:双股一环状DNA 5、荚膜 6、鞭毛:长而粗(H抗原),起运动作用。 四.微生物学特性: ( 一). 形态、染色: 自病人新分离的霍乱弧菌为革兰氏阴 性短小稍弯曲的杆菌,无芽胞,菌体两端钝 圆或稍平,菌体单端有一根鞭毛,长可达菌 体长度的4~5倍,运动极为活泼。 (二)培养特性 生长要求: 1、营养要求简单 在普通培养基上生长良好,属兼性厌氧菌。 2、怕酸嗜碱 可繁殖的酸碱度(pH)为6.0~9.2,适宜的pH为7.2~7.4。初次分离,常用 pH8.5的碱性蛋白胨水。培养增菌6-8h,可抑制其他杂菌的生长。 3、耐一定浓度的盐 4、需氧性强、又具兼性厌氧 5、怕冷喜湿嗜中温 生长温度为16~42℃,培养温度以37℃最为适宜。 6. 在培养基上的生长特性 液体培养基: 碱性蛋白胨水 固体培养基:庆大平板 半固体培养基 五、霍乱弧菌的主要抗原和血清分型 (一)鞭毛抗原(H抗原):特异性低,不耐热,100℃ 2h 即被破坏。 (二)菌体抗原(O抗原) :特异性强,耐热,具有群和型特异性。 根据O抗原的不同霍乱弧菌已有200个以上的O血清群 1. O1群 (1)根据O抗原成分的不同分群特异性抗原因子(A抗原因子)和型特异性抗原因子(B和C抗原因子) 六.霍乱弧菌的抵抗力 (一)对温度的耐受力 1. 无芽胞,对热耐受力不强。零度以下可活14天左右。 2. 实验室保存菌种时放室温,不放冰箱 (二) 对干燥的耐受力敏感,干燥的玻片上3小时左右死亡。 (三)对各种常用消毒剂如含氯制剂、碘制剂均为敏感。 (四) 对强氧化剂极为敏感。 (五)在有藻类或甲壳类等生物的淡盐水中可 进一步使其存活时间延长. (六)在条件适宜时可以繁殖,甚至越冬。 (七)加热是杀死霍乱弧菌的最好方法。 七.对抗菌药的敏感性 人群对霍乱弧菌普遍易感,霍乱病人一般预后较好,重症霍乱病人不及时治疗常因循环衰竭导致死亡。 霍乱病人的治疗以预防脱水,治疗脱水,合理使用抗菌药物为原则:首选口服补液或输液,选用喹诺酮类(氟哌酸、环丙沙星)等抗菌药物同时治疗。 病后免疫力不持久,接种霍乱疫苗预防效果欠佳。 八.霍乱弧菌变异 1.形态:直杆状或多形性、或失去动力 2.菌落:光滑(S)型、粗糙(R)型

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