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实验二几种抗生素的抑菌实验
实验三：侵染菌种对除菌抗生素的敏感性 目的 通过本实验使学生了解了外源基因转化过程中抗生素筛选的原理与基本方法及抗生素对农杆菌和白桦转化植株的抑菌作用，掌握了确立最佳的抗生素种类与浓度的方法。 原理 在遗传转化时，当植物材料受到农杆菌侵染后,需要抗生素及时有效地抑制、杀死细菌,以防细菌的大量繁殖影响植物组织的生长和分化.选择不同浓度梯度的抗生素以观察不同抗生素对农杆菌的抑制效果，从而确定抗生素的种类、适用范围和使用量，为今后植物转基因研究提供理论依据 实验仪器设备： 超净工作台，酒精灯，镊子，培养皿，移液器；YEP固体和液体培养基，四种抗生素，无菌水,6 种国产医用头孢类抗生素：头孢他啶、头孢唑啉钠、头孢拉定、头孢哌酮钠、头孢曲松钠和头孢噻肟钠等 实验材料： 根癌农杆菌( Agrobacteriumtumef aciens) 菌株为LBA4404，无菌滤纸 抗生素的配制 配置的过程及不同浓度 培养基配制与灭菌 抗生素对农杆菌的抑菌实验 浓度梯度设计表格 步骤 挑取农杆菌单菌落,接种于YEP 液体培养基中(含卡那霉素和利福平各50 mg/ L) ,在28 ℃、220 r/ min 下振荡培养至菌液OD600值为0.5 ,将250μL 农杆菌加入到25 mL已冷却到50 ℃左右的YEP 固体培养基中混匀倒平板,然后用6 mm2 无菌滤纸片蘸取不同种类和浓度（要写上种类和浓度）的头孢类抗生素置平板上,28 ℃下暗培养,2 d 后观察抑菌圈的大小。 结果 * *
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