补充 微生物培养技术.pptVIP

2. 富集培养 富集培养是微生物学家最强有力的技术手段之一。营养和生理 条件的几乎无穷尽的组合形式可应用于从自然界选择出特定微 生物的需要。 根据微生物的特殊要求，从自然界分离出特定已知微生物种类； 分离培养在特定环境中能生长的微生物； 六、二元培养物 培养物中只含有二种微生物，而且是有意识的 保持二者之间的特定关系的培养物称为二元培养物。 病毒和宿主细胞； 纤毛虫、变形虫和粘细菌； 微生物学实验室的常规操作程序 第二节 显微镜和显微技术 几个基本概念： 放大 分辨率 反差 被观察物越小，放大倍数应越大，否则难以看清！ 能辨别两点之间最小距离的能力 被观察物区别于背景的程度 与显微镜的自身特点有关，但也取决于进行显微观察时对显微 镜的正确使用及良好的标本制作和观察技术，这就是显微技术。 一、显微镜的种类及原理 1. 普通光学显微镜(0.2um) 复 式 显 微 镜 一、显微镜的种类及原理 1. 普通光学显微镜 光学显微镜一般配置的最大放大倍数是多少？为什么？ 如何实现光学显微镜一般配置的最大放大倍数？其原理？ 目镜：10 ~ 15 ╳；物镜： 100 ╳；总放大倍数1000~1500 ╳； 使用油镜，即在100 ╳物镜和载玻片之间滴加香柏油； 0.5 l 分辨率（最小可分辨距离）= ———— n sin q 1. 普通光学显微镜 分辨率与所用 波长成反比！ 1. 普通光学显微镜 0.5 l 分辨率（最小可分辨距离）= ———— n sin q q为物镜镜口角的半数，它取决于物镜的直径和工作距离 1. 普通光学显微镜 0.5 l 分辨率（最小可分辨距离）= ———— n sin q N：玻片与物镜间介质的折射率 显微观察时可根据物镜的特性而选用不同的介质 空气 (n=1.0)、水 (n=1.33)、香柏油 (n=1.52)、玻璃 ( n=1.54) 1. 普通光学显微镜 光线在穿过折射率不同的介质时发生折射 1. 普通光学显微镜 玻璃透镜的工作原理 很多原来由于在透镜及载片表面的反射和折射而损失的 光线可以进入物镜，使照明亮度提高，改善观察效果。 用浸没油取代空气的作用： 介质折射率提高 数值孔径值和分辨率均得到提高 浸没油与玻璃的折射率相近 光学显微镜物镜的特性 人眼的分辨能力在0.2 mm左右，因此光学显微镜的最大 有效放大倍数（使用油镜）是1,000×到1,500×。 * 纯培养和显微技术 微生物的基本特点： 小！ 在绝大多数情况下都是利用微生物的群体来研究其属性； 微生物的物种（菌株）一般也是以群体的形式进行繁衍、保存； 培养技术在微生物学中具有重要意义！ 在研究中所使用的微生物培养群体： 培养物：在人为规定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体 混合培养物：含有多种微生物的培养物； 纯培养物： 只有一种微生物的培养物； 通常情况下只有纯培养物才能提供可以重复的结果 纯培养技术是进行微生物学研究的基础！ 微生物个体微小的特点也决定了显微技术是进行微生物 研究的另一项重要技术，因为绝大多数微生物的个体形态 及其内部结构只能通过显微镜才能进行观察和研究。 微生物的基本特点： 小！ 显微技术包括标本的制作、观察、测定、分析及记录等 方面的内容。 第一节 微生物的分离和纯培养 从混杂的群体中分离特定的某一种微生物， 是研究和利用微生物的第一步。 一、无菌技术 用于分离、培养微生物的器具事先不含任何微生物； 在转接、培养微生物时防止其它微生物的污染； 1、微生物培养的常用器具及其灭菌 常用的器具： 试管、三角瓶、培养皿等 1887年，R J Petri 发明 Petri dish 高温干热灭菌 高压蒸汽灭菌 试管、瓶子、培养皿等 常用的灭菌方法： 1、微生物培养的常用器具及其灭菌 常用的器具： 2、接种