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园艺植物花药培养分析 　　摘要: 目前，利用花药培养产生单倍体的技术被广泛的应用在多种植物上。中国的科技人员首次在小麦、玉米、大豆、橡胶、杨树等植物的花粉再生植株的培育上获得成功。在20世纪70年代中国科学家陆续开展了观赏植物的花药培养单倍体的研究，也从四季海棠、芍药等的花粉或花药获得单倍体植株或单倍体愈伤组织。 　　关键词:花药培养;观赏植物;影响因素 　　中图分类号：S688 　　自1964年从由毛叶曼佗罗的离体花药中成功诱导出单倍体植株后，很多国家都相继进行了这个方面的研究，促进了植物花药单倍体育种技术的发展。将花药培养成单倍体植株，再经过染色体加倍，能很快得到纯合的二倍体，这样将大大缩短育种年限。 　　1影响观赏植物花药培养的因素 　　1.1基因型的影响 　　植株的基因型在花药离体培养中起着十分重要的作用，不同基因型的植物对培养的反应不同，主要表现在是否能诱导胚状体的生成，生成量的多少及由胚状体再生植株的能力的大小，王延玲在研究中发现仙客来花药胚状体的诱导率与供体植株基因型有很大的关系，供体基因型不同，胚状体诱导率相差很大，高者为48.8%，低的仅为14.7%。但是这种作用也不是一成不变的。Amos和Scholl在拟南芥的两个栽培种中成功诱导出单倍体愈伤组织，而这两个种早期曾被认为是不适合诱导植株的这一现象在观赏植物中还未发现。 　　1.2供体植株的年龄和生理状况 　　一般来说，取相对年幼植株的开花始期的花药比开花末期植株上的花药更合适。 　　供体植株的生理状况对雄核诱导频率有直接的影响，一般在适宜条件下生长而成的健康植株的花药培养的胚诱导率和植株再生率高，冬春季较夏秋季适合于花药培养。供体植株生长环境中的的温度、光强也与花药的反应有着复杂的相互作用。YoshijiNiimi的试验结果发现采自温室成长植株的花药在诱导愈伤组织时所需的激素水平要高于陆地栽培的植株。花朵的着生部位也会影响花药的反应，LjiljanaRadojevic等将七叶树的花序分为上中下三段，下端的花粉繁殖力要高于中间和上端。李范在试验中发现采集时间也会影响到花粉的萌发率，上午采集的锦带花粉的生活???、花粉萌发率较高，而下午较低。 　　1.3花粉的发育时期 　　花粉的发育时期是诱导小孢子分裂的关键，处于不同发育阶段的小孢子，其花药培养效果差别很大。只有发育到一定时期的花药，才对外界刺激最敏感，而不同植物的花粉对外界刺激的敏感时期是不同的。适用于花药培养的花粉发育的临界时期在物种之间是不同的。对多数植物来说，单核中期至单核晚期的花粉都易形成花粉愈伤组织或花粉胚。观赏植物的花药培养采用的也多是这一时期的花药，如：观赏茄、仙客来、羽衣甘蓝、刚果12号桉、中国水仙、百合等。 　　1.4预处理 　　培养前对花芽或花药进行物理或化学处理能够有效的提高花粉发育成小植株的诱导率。常见的措施有：温度处理，包括低温和高温处理、离心、乙烯利处理、甘露醇处理和常温饥饿预处理等。其中低温处理是目前在观赏植物上广为采用的提高花药诱导率的有效措施，低温处理时间视使用的温度而定，一般来说较低的温度处理时间短，较高的温度处理时间长。王延玲等在试验中发现经过低温可以提高愈伤组织的诱导率，不经低温预处理，只有个别品种能够产生胚状体，时间过长或过短，都不利于胚状体的诱导，并认为低温预处理是仙客来花药诱导胚状体不可缺少的环节。 　　但也有一些植物，如茄子的花药只有经过热处理才能产生胚状体。宋明等在实验中发现单独热激处理的效果稍优于单独低温预处理，而两者配合处理并没有明显的叠加效果。 　　1.5基本培养基及附加成分 　　基本培养基是花药培养中影响花粉启动和再分化的重要条件，不仅决定着花药培养的成功，还决定着雄核发育的方式。培养基常常因植物种类的不同而异，如：仙客来、万寿菊培养时使用的是B5培养基，竹子是N6培养基，矮牵牛用的是NitschH培养基，观赏茄、百合、中国水仙是MS培养基，羽衣甘蓝以Keller培养基效果最佳。有研究表明液体培养基能提高小孢子胚发生率，并认为该结果是因为消除了花药壁的抑制作用，提供了充分的营养或者消除琼脂对雄核发育的抑制作用。但目前在观赏植物的花药培养中还是以固体培养为主。 　　在培养基的各种成分中，激素的水平和配比非常重要，常对诱发细胞的分裂，生长和分化起决定作用。花粉是发育成胚状体还是愈伤组织很大程度上取决于培养基中激素的种类和浓度。在花药培养中常用的激素有二类：一类为生长素类，另一类为细胞分裂素类。木本植物花药培养要求在分化培养基中同时具有生长素和细胞分裂素，缺少其中之一对小孢子的脱分化均不利。而草本植物花药培养对植物生长调节剂的要求却无固定规律。 　　此外，其它有机成分如水解乳蛋白、精氨酸、谷氨酰胺等对诱导率也有一定程度