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不同炮制时间和温度对苍耳子中2种酚酸含量影响 　　摘要：目的 测定不同炮制时间和温度下苍耳子中绿原酸、3，5-二咖啡酰奎宁酸的含量变化，确定苍耳子炒制的最佳工艺。方法 采用砂炒法，温度150～220 ℃，时间0.5～7 min，每一温度分别炒制浅黄、黄褐色2份炮制品，共得到16份炮制样品。采用超高液相色谱法同时测定绿原酸、3，5-二咖啡酰奎宁酸含量。色谱柱：Acquity BEH C18（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱；流速：0.25 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：327 nm。结果 炮制品中绿原酸和3，5二咖啡酰奎宁酸的含量以160 ℃、7 min最高，分别为2.498、2.004 mg/g。结论 综合炮制品的外观和绿原酸、3，5-二咖啡酰奎宁酸的含量测定结果，确定砂炒苍耳子以160 ℃、7 min较好。 　　关键词：苍耳子；炮制；绿原酸；3，5-二咖啡酰奎宁酸；超高液相色谱法 　　中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2014）04-0082-04 　　苍耳子是中医临床治疗鼻渊头痛的要药，在《神农本草经》中列为中品，原名?耳实[1]。2010年版《中华人民共和国药典》收录的苍耳子来源为菊科植物苍耳Xanthium sibiricum Patr.的干燥成熟带总苞的果实。对该药材的炮制要求是：除去杂质后，照清炒法炒至黄褐色，去刺，筛净[2]。该炮制工艺在实际操作中存在一些不合理因素。由于未去刺的苍耳子生品非常容易粘连成团，难以分开，这种情况下清炒炮制会导致其受热不均匀，出现一部分夹生、另一部分焦糊的现象；另外，炒制后苍耳子质地变松脆，易出现刺残存率高、种子易破裂等现象，最终影响药材质量。因此有必要对其炮制方法进行适当改进。 　　现代药理研究表明，苍耳子中含有多种酚酸类化合物，是主要的活性成分，具有抗炎和镇痛等药理作用[3]。前期研究表明，苍耳子酚酸类成分中含量较高的为绿原酸和3，5-二咖啡酰奎宁酸[4]。本试验采用去刺后砂炒法炮制苍耳子，超高液相色谱法（UPLC）测定绿原酸和3，5-二咖啡酰奎宁酸含量，通过比较不同炒制时间和温度对苍耳子中2种酚酸含量的影响，确定其最佳炮制条件，为苍耳子炮制工艺和机理研究提供依据。 　　1 仪器与试药 　　Waters超高效液相色谱仪（Waters Acquity H-Class UPLC，美国Waters公司），包括四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、PDA检测器以及Empower 2工作站等；KQ3200DB型超声清洗器（江苏昆山超声仪器有限公司）；XFB-200型高速中药粉碎机（吉首市中州制药机械厂）；BP211D型电子天平（德国Sartorius公司）；电子万用炉（2 kW/220 V）；不锈钢炒锅、锅铲、20目铁筛、温度计、计时器等。 　　绿原酸（纯度99.39%，批号110753-200413），购自中国食品药品检定研究院；3，5-二咖啡奎宁酸（批，购自四川成都曼斯特化工有限公司，经1H-NMR、13C-NMR、MS、IR和UV等光谱检测确认其结构，按归一化法测得其纯度为99.20%。苍耳子产地为河南省，经本文通讯作者鉴定为菊科植物苍耳Xanthium sibiricum Patr.的干燥成熟带总苞果实。色谱纯乙腈（DIKMA公司）；甲醇、磷酸等试剂均为分析纯；蒸馏水（屈臣氏公司）；0.22 μm有机针孔滤膜（安捷伦科技有限公司）。 　　2 方法与结果 　　2.1 苍耳子炮制品制备 　　生苍耳子炮制前机械去刺。按2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录Ⅱ D项下砂炒法，取药材8倍量砂置锅内预热，武火加热至砂子滑利状态，测定离锅底1 cm左右处的温度，设定为炒制温度[5]，然后再投入苍耳子，每份50 g，共计16份，秒表计时。以炮制成品的颜色程度来决定炮制时间，每个时间点分别炒制浅黄色和黄褐色的炮制品各1份。当苍耳子炒制规定时间和颜色时出锅，立即过筛，放凉，得到不同时间和温度条件下的炮制品。将炮制好的16份苍耳子和生苍耳子粉碎，过20目筛，备用。试验共进行2次。 　　2.2 供试品溶液的制备 　　分别取按预定炮制条件制备好的苍耳子各样品粉末约0.3 g，精密称定，置于10 mL棕色量瓶内，用甲醇定容，超声提取（150 W，40 Hz）30 min，放冷，加甲醇补足损失容量，摇匀，再次静置，临用前用0.2 μm滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。 　　2.3 对照品溶液的制备 　　精密称取绿原酸、3，5-二咖啡酰奎宁酸对照品适量，置10 mL棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液；分别取对照品储备液适量，置另一10 m