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从芹菜中提取总黄酮工艺分析 　　论文摘要：目的为充分利用芹菜食物资源，避免资源的浪费，探讨芹菜总黄酮的提取及鉴别方法。方法采用超声波乙醇浸提法从芹菜中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类物质进行验证，并用分光光度法测定含量。结果测得样品中总黄酮的含量C=0.2126 mg/ml，回收率为100.3%，其纯度和产率均较高。结论该方法采用全物理过程，无任何污染，是提取芹菜黄酮类物质的有效途径。 　　主题词： 芹菜 提取 总黄酮 　　中图分类号：P746.2+2 　　芹菜Apium graveolens L.属伞形花科一年生或二年生草本植物，异名药芹、旱芹。芹菜味辛、甘，性凉，营养丰富。已有研究证实，芹菜含有丰富的黄酮类化合物、多不饱和脂肪酸、矿物元素、丁基苯酞类、萜类、香豆素衍生物、叶绿素、氨基酸与维生素、膳食纤维等，其中，黄酮类化合物主要成分为水蓼素及7-甲基水蓼素，医学证明，这2种黄酮类化合物是 治疗 高血压的有效成分。在药理上，芹菜还具有降压、安神、降血糖、血脂、软化血管、增强免疫力、增进食欲和健胃等药理作用。还可作为神经衰弱、小便热涩不利、月经不调等症的食疗。芹菜中含有大量膳食纤维素，经常食用有促进肠蠕动、防治便秘以及预防大肠癌等。 　　有文献报道芹菜中总黄酮的提取方法采用乙醇提取，但是，这种方法的提取效率仍然较低。近年来，超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道，表明其具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。很多研究表明，利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响。但超声技术应用于提取芹菜中黄酮类物质的研究尚未见报道，本文报道用超声波提取芹菜总黄酮及鉴别。 　　1 仪器与试剂 　　1.1 仪器 　　KQ5200DB型数控超声波清洗器（超声工作频率40kHz、昆山市超声仪器有限公司）；UV755B紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；ZF-I型三用紫外分析仪（上海顾村光电仪器厂）；SHBIII循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）。 　　1.2 试剂 　　95%乙醇AR；亚硝酸钠AR；硝酸铝AR；氢氧化钠AR；三氯化铝AR；盐酸AR；氨水AR；冰醋酸AR；醋酸乙酯AR；芦丁标准品（ 中国 药品生物制品检定所）；新鲜芹菜买自百色市农贸市场。 　　2 方法与结果 　　2.1 总黄酮成分提取 　　取新鲜芹菜，烘干，粉碎。称取芹菜粉末约6 g，加80 ml 95%乙醇，超声波提取2.5 h，抽滤。滤渣再加80 ml 95 %乙醇，超声波提取2.5 h，抽滤，合并两次滤液，减压回收乙醇至滤液仅剩5～7 ml为止，放置100 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。 　　2.2 测定方法依据 　　以芦丁为对照品测定芹菜中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。 　　2.3 定量实验-总黄酮的含量测定 　　2.3.1 波长的选择取样品液适量，在0.30 ml 5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420～700 nm波长范围测定络合物的吸光度，络合物于510 nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。 　　2.3.2 标准曲线的绘制分别精密吸取芦丁对照液（0.13 mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 ml于10.00 ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30 ml，摇匀，静置6 min；再加10%硝酸铝溶液0.30 ml，摇匀，静置6 min；再加4%氢氧化钠溶液4.00 ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置12 min，以试剂作空白参比液，于510 nm处测定吸光度。 　　2.3.3 提取物含量的测定精密吸取样品液0.50 ml，置10.00 ml容量瓶，按标准曲线的制备方法测定其吸光度A=0.137，根据回归方程：A=3.619×103+12.34C， 计算 样品中总黄酮的含量C=0.216 2 mg/ml。 　　2.3.4 回收率实验 　　精密量取样品液1.00 ml，加入标准芦丁对照品1.00 ml（0.13 mg/ml），同前样品测定方法操作测定吸光度，求出回收率为100.3% 。 　　2.4 定性实验-总黄酮的鉴别 　　2.4.1 颜色反应紫外光下呈色反应：取该样品溶液点在滤纸上，在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈灰褐色并有荧光斑点。 　　浓氨水反应：取该样品溶液点在滤纸上，将滤纸在氨水上方熏30 s，立即在紫外光下观察，呈极明显的