不同碳氮浓度对苏云金芽胞杆菌的影响.docVIP

不同碳氮浓度对苏云金芽胞杆菌的影响 毕艳梅 陈忆 摘要：确定不同浓度培养基成分对苏云金芽孢杆菌发酵的影响。实验结果表明，不同浓度培养基成分配比对苏云金芽孢杆菌生长影响差别很大，2%的碳浓度对苏云金芽孢杆菌生长较好，不同的豆饼粉对苏云摘要：研究不同碳氮浓度对苏云金芽孢杆菌生长情况的影响，对苏云金芽孢杆菌液态发酵培养基进行优化，将发酵产品干燥粉碎后制成菌悬液，通过测量其吸光度来金芽孢生长影响不大。利用蒽酮硫酸法测定培养基中糖的含量，分光光度计测定吸光值，在一定范围内吸光度与糖浓度呈线性比例 Outline:Suresomemediumcomponentswithdifferentconcentrations of the influence of bacillus fermentation. Experimental results show that different concentration distribution medium into some bacillus than 2% growth influenced differenceisverybig,thecarbon concentration on some bacillus grew more good, different DouBing powder on SuYun the carbon and nitrogen: different concentration of some bacillus, the influence of the growth of some bacillus liquid fermentation, will optimize dry fermentation products made after smashing suspension liquid, as measured by bacteria its absorbency to gold spores little effects on growth. Using the determination of anthraquinone ketone sulfuric acid medium sugar content, absorb the light spectrophotometer to measure values, within the scope of certain and absorbency and sugar concentration linear proportion。 关键字：苏云金芽孢杆菌 芽孢率 蒽酮硫酸法 分光光度计 Keywords: some bacillus spores rate anthracene ketone hydrate-sulfuric s 前言：苏云金芽孢杆菌(简称Bt)是目前世界上生产和使用量最大的生物杀虫剂，属革兰氏阳性菌。在稳定生长期可形成半胞晶体，又称杀虫晶体蛋白。与化学杀虫剂相比，苏云金芽孢杆菌对营养物质的要求不高，0．075％～OI 225％ 、含糖0．1 ～1．5 和糖氮比0．44～2O．0的环境下就能很好地生长 ，但是选合适的碳源、氮源和无机盐以及它们之间的比例直接影响到目标产物伴孢晶体的产生 。目前BT发酵培养基配方主要有玉米粉，酵母粉，豆饼粉，面粉，鱼粉以及其他一些因素，但由于配比的不合适，使得Bt伴胞晶体含量不高调整培养基中各种物质的配比，可以改善细菌生长条件，提高BT伴胞晶体含量。 1 材料与方法 苏云金芽孢杆菌：由合肥工业大学生物与食品工程实验室提供。 1.1.碳源单因子发酵培养基：面粉（0.5%，1%，2%） 豆饼粉0.5% 硫酸二氢铵0.04% 磷酸二氢钾0.04% 硫酸镁0.01% 酵母粉1.6% 1.2.氮源单因子发酵培养基豆饼粉（0.3%，0.5%，0.7%） 面粉1% 硫酸二氢铵0.02% 磷酸二氢钾0.04% 硫酸镁0.01% 酵母粉1% 1.3.液体种子培养基 牛肉膏蛋白冻培养基 1.4.发酵条件 250ml三脚瓶装30ml培养基, 初始pH7～8 高压灭菌121℃ 20 m in. 以体积分数为1% 接种量转接液体菌种, 置于28 ℃, 200 r/m in 的摇床内进行发酵培养; 92 h 后对发酵液中的芽孢含量进行测定. 　1.5.培养基的优化 通过单因子实验确定苏云金芽孢杆菌培养基的最适碳氮源浓度, 影响芽孢产量的重要因子, 再通过梯度实验法和平板涂布法分析对重要因子的水平进行优化 1.6.水平设计 不同浓度的培养基共六个锥形瓶实验中要有无菌意识，无菌做的好坏是影响实验质量的重