蒜氨酸和蒜氨酸酶的制备及抑菌作用的研究.pptVIP

蒜氨酸和蒜氨酸酶的制备及抑菌作用的研究 近年大蒜及大蒜制品风靡全球，被誉为天然“药用植物黄金”。大量的研究表明，大蒜有消炎杀菌、抗病毒、降血压，抗氧化、抗血栓、抗肿瘤、调节机体免疫力等多种功效。大蒜中具有药理作用的成分主要是一类含硫的有机化合物——蒜素(allicin主要成分是二烷基硫代亚磺酸脂和烷基-2-丙烯基硫代亚磺酸脂)，被认为有重要的抗微生物活性 蒜氨酸酶和蒜氨酸的分离纯化 酶活力的测定 蒜氨酸的HPLC 测定 抑菌实验 一、蒜氨酸酶和蒜氨酸的分离纯化工艺流程 二、阳离子交换树脂分离蒜氨酸 分离蒜氨酸酶后的蒜渣，立即灭蒜氨酸酶活性后，加蒸馏水抽提蒜氨酸。蒜氨酸抽提液上732 阳离子交换0.7mol/L 氨水洗脱，分部收集，通过茚三酮反应合并含蒜氨酸的9～20 瓶，真空缩，浓缩液按1:1 比例加入乙醇，调pH 到5.5，放置4℃冰箱静止24h，析出蒜氨酸晶体，进行HPLC 分析。对照品的保留时间为4.312min，本实验分离纯化的蒜氨酸样品的保留时间4.345min，二者非常接近，可以断定上述分离纯化方法能够得到较纯的蒜氨酸。 三、大蒜提取物的抑菌作用 大蒜汁、蒜氨酸酶、蒜氨酸的抑菌作用见表1 ，分别以溶解蒜氨酸酶的Na/K 磷酸缓冲液和溶解蒜氨酸的无菌水做空白。蒜氨酸酶对白色假丝酵母菌，克柔假丝酵母菌抑制作用最强；对表皮葡萄球菌、奇异变形杆菌、宋内氏志贺氏菌的抑菌作用次之；对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克可雷伯菌、臭鼻克雷伯菌、类产碱假单胞菌、福氏志贺氏菌、鲍曼不动杆菌较弱；对铜绿假单胞菌、粪肠球菌无抑制作用。蒜汁对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎可雷伯菌、福氏志贺氏菌的抑菌作用与蒜氨酸酶相同；而对表皮葡萄球菌、奇异变形杆菌、臭鼻克雷伯菌、宋内氏志贺氏菌、鲍曼不动杆菌、白色假丝酵母菌及克柔假丝酵母菌的抑菌作用均比蒜氨酸酶弱；对类产碱假单胞菌的抑菌作用比蒜氨酸酶强。蒜汁与蒜氨酸酶相同也对铜绿假单胞菌、粪肠球菌无抑制作用。蒜氨酸对上述所有菌都没有抑制作用。 本研究先从大蒜中分离纯化蒜氨酸酶，再从蒜渣中纯化蒜氨酸，可以得到蒜氨酸酶和较纯的蒜氨酸，这对于综合利用大蒜中的有效成分有非常重要的意义。 * 单击此处编辑母版标题样式 收集硫酸铵沉淀的粗酶，测定粗酶活力为15.2U/ml，该粗酶用于抑菌实验。 蒜氨酸对照品HPLC 色谱图 蒜氨酸样品HPLC 色谱图 *