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第八章 比色分析法Colorimetry Analysis 物质的颜色与光的关系 吸收曲线 朗伯－比尔（Lambert--Beer）定律 例1、 例2、 §8.2 比色分析测定方法 二、分光光度法 ２、分光光度法的测定方法 空白溶液（参比溶液） 应用示例----铁的含量测定 （2） 标准对照法 * §8.1 比色分析法基本原理 §8.2 比色分析测定方法 原理：有色物质溶液颜色的深度与其浓度和液层厚度有关。通过比较溶液颜色的深浅，测定溶液的浓度。 特点：简单、快速、灵敏度高；相对误差较大。 §8.1 比色分析法基本原理 如果溶液吸收了一部分波长的光，则溶液呈现透过溶液后剩余部分光的颜色（吸收光颜色的补色）。 青（490~500nm） 白光 （580~600nm）黄 蓝（450~480nm） 紫 （400~450nm） 青蓝（480~490nm） （560~580nm） 绿 （600~650nm）橙 （650~760nm）红 光的互补色示意图 物质显色原理:对光的选择性吸收。 KMnO4溶液的吸收光谱曲线 A~λ曲线 不同物质有不同吸收曲线，可定性鉴别。 同种溶液，吸收曲线相似，但吸光度随浓度而改变。可定量测定。 定量测定时一般选择最大吸收波长λmax的单色光作为入射光。 （单色光） I/I0-------透光率T lgI0/I-----吸光度A K------吸光系数， 与吸光物质的种类和入射光的波长有关。 c以g·L-1为单位时的吸光系数称为质量吸光系数a c以mol·L-1为单位时的吸光系数称为摩尔吸光系数ε 吸光系数越大，表示溶液对入射光越容易吸收。 某待测液用1.0cm吸收池测量时，其透射光强度为入射光强度的1/2，在同样波长下，若用2.0cm吸收池测量该溶液，其透光率和吸光度各为多少？ 解： 已知在525nm处KMnO4溶液的ε＝2235L·mol-1·cm-1，若用2cm比色皿，为使所测得的透光率介于20%－65%之间，溶液的浓度范围应为多少？ 若T＝20% 若T＝65% c = 4.19×10-5(mol·L-1) 溶液的浓度范围:1.56×10-4 ~ 4.19×10-5mol·L-1。 解： 一、目视比色法 用视力比较样品溶液与标准品溶液的颜色深浅以确定物质含量。 A标＝A样（颜色深度相同） c标L标＝c样L样 当L标＝L样时，c标＝c样 标准系列法: 　　以钨灯或氢灯光作光源，经单色光器分光后，以所需波长的单色光作入射光，通过测定溶液吸光度来求算溶液中被测物质含量的一种分析方法。 １、分光光度计 光源 可见区：钨灯（360~1000nm ） 紫外区：氢灯（200～400nm） 单色器（控制入射光波长） 棱镜或光栅、准直镜、狭缝等组成。 吸收池或比色皿（盛放待测溶液）。 材质：光学玻璃（可见区）或石英玻璃（紫外区） 规格： 0.5、1.0、2.0、3.0cm等 注意事项：透光面要注意保护，比色皿的配套。 （１）标准曲线法 配制一系列不同浓度的标准溶液，用选定的显色剂显色。作吸收曲线选择测定波长。 用选定波长的入射光,测定标准溶液的吸光度；以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线。 在相同条件下，测量待测溶液吸收度，并在标准曲线上查出其相应的含量。 溶剂空白 当显色剂及制备试液的其它试剂均无色，试样溶液中无其它有色物质干扰时，可用溶剂作空白溶液。 试剂空白 若显色试剂有色，试样溶液中无其它有色物质干扰时，用试剂空白进行校正。试剂空白：按显色反应相同的条件加入各种试剂和溶剂(不加试样溶液)后所得溶液。 试样空白 当试样基体有色(如试样中混有其它有色离子)，但显色剂无色，且不与试样中被测成分以外的其它成分显色时，可用试样空白校正。试样空白：不加显色剂但按显色反应相同条件进行操作的试样溶液。 1. 原理 2、操作步骤 (2)标准曲线的绘制 入射光波长420nm，试剂空白，A~cFe3+作图。 (3)样品的测定 浓度在标准曲线标示浓度范围内，入射光波长420nm，试剂空白。 Fe3++3HSal- [Fe(Sal)3]3-+3H+ pH8~11.5 （黄） (1)吸收曲线的绘制 找出λmax =420nm 先配制一个与被测物质溶液的浓度相近的标准溶液，与被测溶液在相同条件下测定吸光度 ： A标 = K标b标c标 A样 = K样b样c样 K标 = K样 b标=b样 * * *