tgf-β1smad信号通路调控哈萨克族食管鳞癌上皮间质转化的分析-tgf - β 1 smad signaling pathway regulates epithelial-mesenchymal transition in kazak esophageal squamous cell carcinoma.docx

摘 要 目 的：探讨 TGF-β1/Smad 信号通路在食管鳞癌上皮-间质转化（EMT）的作用及其机制；在细胞 学实验的基础上探讨 TGF-β1/Smad 信号通路蛋白和 EMT 相关蛋白在哈萨克族食管鳞癌中的表达， 分析其与临床病理特征的关系，为深入研究 TGF-β1/Smad 信号通路调控哈萨克族食管癌 EMT 的发 生发展作用机制奠定基础，为食管癌浸润转移的阻断治疗提供理论基础。 方 法：用不同浓度的重组 TGF-β1 刺激及 TGFβ 受体抑制剂 SB431542 抑制处理食管癌细胞 Eca109， 采用 Western Blot 方法检测 TGF-β1/Smad 通路和 EMT 相关蛋白表达水平；Transwell 侵袭实验检测 侵袭和迁移能力；进一步运用免疫组化检测 100 例食管鳞癌组织和 58 例癌旁非癌组织构成的组织芯 片，研究 TGF-β1/Smad 信号和 EMT 相关蛋白的表达，分析 TGF-β1/Smad 和 EMT 相关蛋白与临床 病理参数的关系。 结 果： TGF-β1 处理 Eca109 细胞，可以诱导细胞发生 EMT 形态改变，并且增强细胞侵袭能力， Western Blot 检测发现 N-cadherin、Vimentin、Smad2/3 和 Smad4 蛋白表达显著上调，但 Smad7 蛋白 表达下调；而 SB431542 处理细胞，结果显示：Vimentin、Smad2/3 和 Smad4 蛋白表达水平下调，Smad7 蛋白表达水平上调；免疫组化检测哈萨克族食管鳞癌组织中 TGF-β1、p-Smad2/3、N-cadherin 和 Vimentin 蛋白表达明显高于癌旁组织中的表达（p＜0.001），E-cadherin 蛋白在食管鳞癌组织中的表 达低于癌旁组织中的表达（p＜0.001）；TGF-β1 的表达与 p-Smad2/3 的表达呈正相关 (r=0.186， p=0.064)，与 E-cadherin 的表达呈负相关关系 (r=－0.221, p=0.027)，与 N-cadherin 表达呈正相关关 系 (r=0.321, p=0.001)，与 Vimentin 表达呈正相关，但差异无统计学意义(r=0.113, p=0.265) 结 论： 1. TGF-β1/Smad 信号转导通路介导食管鳞状细胞癌细胞系 Eca109 发生 EMT；2. TGF-β1、 p-Smad2/3 蛋白在食管鳞癌中高表达，且 TGF-β1 与 E-cadherin 表达呈负相关，与 N-cadherin 表达呈 正相关，提示 TGF-β1/Smad 信号通路调控的 EMT 改变与食管鳞癌发生发展密切相关。 关键词：食管鳞状细胞癌；TGF-β1/Smad 信号转导通路；EMT；组织芯片 论文类型：A(基础研究) 基金项目：本课题基金来源国际科技合作与交流专项（2010DFB34100）；“十一五”国家科技 支撑计划项目（2009BAI82B03）；国家自然科学基金；人社部留学人员科技活 动择优资助项目（2011LX004）  Abstract Objective: To investigate the effect and mechanism of TGF-β1/Smad signaling pathway in esophageal squamous cell carcinoma epithelial-mesenchymal transition (EMT); On the basis of the cytological experiments, then to explore TGF-β1/Smad signaling pathway proteins and EMT-related protein expression and analyze its relationship with clinical and pathological features in Kazakh esophageal carcinoma. We further aimed to investigate TGF-β1/Smad signaling was involved in the regulation of EMT and lay the foundation for the development of the mechanism in Kazakh esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) , and to provide a theoretical basis of therapy and tumor’s infiltration a