25羟化胆固醇对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用及其机制研究.docVIP

25-(R)-羟化胆固醇对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究 作者：高雅娜1王阳阳1蔡智慧高桂艳史丽华刘善民 【摘要】目的研究肝X受体（LXR）激动剂25-（R）-羟化胆固醇对大鼠肝脏缺血再灌注(IR)后炎症反应及损伤的影响，并探讨其机理。方法将18只Sprague-Dawley大鼠采用钳夹法制备肝脏IR模型，随机分为假手术组、IR组、羟化胆固醇预处理组，检测再灌注4h和8h后检测血清转氨酶以及肝组织髓过氧化物酶(MPO)水平。Wessternblot方法检测肝组织ABCA1、ABCG1、ICAM-1及iNOS的蛋白表达水平。结果IR组可见ALT、AST以及MPO水平明显升高，ICAM-1与iNOS的表达增加。与IR组相比，T0预处理使ALT、AST及MPO值明显降低，ICAM-1和iNOS的表达降低，然而ABCA1及ABCG1的表达明显升高。结论25-（R）-羟化胆固醇引起的肝脏LXR激活可以通过抑制炎症反应，在肝脏IR损伤中发挥保护作用。 【关键词】缺血再灌注炎症肝X受体 【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectoftheliverXreceptor(LXR)endogenousligand，25-(R)-oxychlesterol，onhepaticinflammationandinjuryinducedbyischemiareperfusion(IR)inratsandexplorethemechanismunderlyingtheprotectiveeffect.MethodsEighteenSprague-Dawleyratswererandomlydividedintothreegroups(6ratsineach)：asham—operationgroup，anischemia?reperfusion(IR)group，aOxycholeserol-IRgroup．At4and8hoursafterreperfusion，thelevelsofALTandASTinserumaswellasmyeloperoxidase(MPO)inlivertissuewereobserved．Additionally，WesternblottingwereperformedtoassayABCA1，ABCG1，iNOSandVCAM-1expression.ResultsComparedwiththesham-operationgroup，thelevelsofALT，ASTandMPOincreaseddramaticallyinmiceoftheIRgroup．IRresultedinincreasedlevelsofALT，ASTandMPO.Twopro-inflammatorygenes，iNOSandVCAM-1，wereinducedbyIR.Incontast，OxycholeserolpreconditionimprovedloweredthelevelofALT，ASTandMPO.Furthermore，iNOSandVCAM-1expressionweredown-regulatedinT0-IRgroup，whereastheexpressionofABCA1andABCG1，LXRclassicaltargetgenes，wereup-regulated.ConclusionsThroughitsinhibitoryeffectoninflammation，hepaticLXRactivationby25-(R)-oxychlesterolplaysaprotectiveroleforIRinjuryintheratliver. 【Keywords】IschemiaReperfusionInflammationLiverXReceptors 肝脏缺血再灌注(IschemiaReperfusion，IR)损伤是肝脏缺血再灌注后肝脏功能障碍和结构损伤加重的现象。炎症反应是肝脏缺血再灌注损伤的重要机制之一[1][2]，近来研究表明，肝X受体（LiveXReceptor，LXR）除调节细胞内胆固醇平衡外，还可发挥抗炎效应[3][4]。本研究小组于2009年首先发现LXR的外源性配体T090131在IR后抑制肝脏炎症反应进而减轻损伤[5]，而本研究拟通过LXR内源性配体25-（R）-羟化胆固醇来诱导肝内LXR激活，观察其对肝脏IR后炎症反应及损伤情况的影响，研究其对肝脏IR损伤的保护机制，为治疗肝脏IR损伤提供新的作用靶点。 1材料与方法 1.1材料：生化自动分析仪(购自德国Bayer公司)，兔抗ICAM-1、ABCG1、ABCA1、iN