实验6--维生素C提取和定量测定.pptVIP

* 维生素C具有很强的还原性，故易被氧化剂氧化而失去生理活性。在干燥条件下，维生素C较为稳定。当受潮、受热或光线照射后，则维生素C易被破坏。所以维生素制剂应在干燥、低温避光处保存。维生素C在酸性水溶液（pH4）中较为稳定，在中性及碱性水溶液中极不稳定，有微量重金属离子（如Cu2+、Fe2+等存在时，更易被氧化分解。在烹调食物时若不注意上述情况，食物中的维生素C很易被破坏而损失。植物组织中含有抗坏血酸氧化酶，能催化维生素C之氧化，所以蔬菜和水果等若储存过久，其中维生素C可遭到部分破坏，而使其营养价值降低。 * * 脱氢抗坏血酸易水解: 二酮基古洛糖酸; 进一步氧化:草酸+L-苏阿糖酸 * 实验八 维生素C的提取及定量测定 一、实验目的 1、学习维生素C的重要性质。 2、掌握2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C的原理和方法。 3、熟悉、掌握微量定量法的基本操作技术。 结构与性质 维生素C/ L-抗坏血酸(ascorbic acid) 多羟基，内酯；酸性； 易被氧化：中、碱性，热，光，重金属破坏 L-抗坏血酸 脱氢抗坏血酸 *若脱氢维生素C进一步氧化，则失去活性 富含维生素C量高的食物（毫克/100克食物) 酸 枣——830-1170猕猴桃——568枣 ——549辣 椒——185山 楂——89柿子椒——89菜 花——88金花菜——85苦 瓜——84雪里红——83 豌豆苗——53油 菜——51橙 ——49柚 ——41柠 檬——40柑 橘——34水萝卜——34大白菜——19西红柿——12 芥菜头——80青 蒜——77 来源 新鲜水果及 蔬菜: 橙类 、番 茄 、辣椒 2,6-二氯酚靛酚 ——氧化还原指示剂 维生素C属于水溶性，具有很强的还原性，易被氧化成脱氢维生素C 维生素C具有很强的还原性，在中性和微酸性环境中，能将染料2，6-二氯酚靛酚（氧化型）还原成无色的（还原型）的2，6-二氯酚靛酚，同时被氧化成脱氢维生素C。当样品中的维生素C全部被氧化后，再滴入的2，6-二氯酚靛酚就不再被还原脱色而呈玫瑰色。 溶液由无色变为微红色时即表示溶液中的维生素C刚好全部被氧化，此时即为滴定终点。从滴定时2，6-二氯酚靛酚溶液的消耗量，可以计算出被检物质中还原型维生素C的含量。 二、实验原理 计算公式： VA为滴定样品提取液所用的2，6-二氯酚靛酚的平均mL数； VB为滴定空白对照所用的2，6-二氯酚靛酚的平均mL数； S为1mL 2，6-二氯酚靛酚溶液相当于维生素C的mg数； W为10mL样品提取液中含样品的g数。 三、器材 研钵 移液管10mL 50ml容量瓶 50ml锥形瓶 微量滴定管 漏斗 纱布 滤纸 药物天平 刻度吸管 三、试剂和材料 绿豆芽 2%草酸溶液 2，6-二氯酚靛酚溶液 标准抗坏血酸溶液 操作步骤 1. 提取：称取新鲜样品约20g，置于研钵中，加入15ml 2%草酸溶液研磨成浆状，残渣再次研磨，一同转入50ml容量瓶中，加草酸定容。 2.过滤：提取液充分混匀后，过滤。 3. 样品滴定：准确吸取滤液10ml于50ml的锥形瓶中，立即用标定过的2，6-二氯酚靛酚溶液滴定至终点，粉红色，15秒不褪色。记录所用染料的毫升数（重复测定2～3次）。 4. 空白滴定：准确吸取2%的草酸10ml于50ml的锥形瓶中，立即用2，6-二氯酚靛酚溶液滴定至终点，粉红色，15秒不褪色。记录所用染料的毫升数（重复测定2～3次）。 5. 标准液滴定 准确吸取标准抗坏血酸溶液5mL，置于50 mL锥形瓶中，用微量滴定管以0.1%2，6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色，并保持15 s不褪色，即达终点。由所用染料的体积计算出1 ml染料相当于多少毫克抗坏血酸（取5 mL 2%草酸作空白对照，按同样方法滴定）。 6. 计算 计算公式： VA为滴定样品提取液所用的2，6-二氯酚靛酚的平均mL数； VB为滴定空白对照所用的2，6-二氯酚靛酚的平均mL数； S为1mL 2，6-二氯酚靛酚溶液相当于维生素C的mg数； W为10mL样品提取液中含样品的g数。 注意事项 (1)某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿等）浆状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇消泡。 (2)整个实验操作过程要迅速，防止样品中还原型抗坏血酸被氧化。滴定过程一般不超过2 min，滴定所用染料不应小于1mL或大于4mL。如果样品含维生素C太高或太低，可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度。 (3)提取的浆状物如不易过滤，也可进行离心，留取上清液进行滴定。 思考题 为什么维生素C标准溶液要用新鲜配制的？ 为准确测得维生素C的含量，实验时要注意那些操作