草鱼mhcclassⅰ等位基因克隆及其多态性分析-cloning and polymorphism analysis of mhc class ⅰ allele in grass carp ( ctenopharyngodon idellus ).docxVIP

中文摘要主要组织相容性抗原复合体(MHC)指集中于动物某一或多个染色体、编码与免疫应答直接相关的一类细胞膜糖蛋白基因群。MHC分为MHCclassI和MHCclass11；MHCclassI由aI、啦、∞链．跨膜区(TM)和胞质区(cY)组成．分子量约44KD。其中，ol链与Ⅱ，链形成多肽结合区(PBD)，与抗原多肽、T细胞受体(TCR)形成三分子复合物(TCR-pMHC)，由此诱导机体产生特异性细胞免疫应答。目前，人类MHCclassI等位基因的结构与数目及其与疾病的关系已研究得十分清楚，而备禽及鱼类MHCclassI结构与功能的研究尚处于发展阶段。为了阐明草鱼MHCclassI等位基因的结构与多态性、进～步研究其与疾病的关系，首先从DDBJ／EMBL／GenBank基因库中读取人、鼠、鸡、蛙和斑马鱼的MHCclassI基因序列，在形成二硫键两半胱氨酸的保守区设计简并性引物，扩增出了草鱼MHCclassIa2区基因Ctid．MHCla2CC。再用3‘·RACE和5’-RACE法分别扩增出草鱼MHCclasslo．2区至Poly(A)尾段基因Ctid—MHCI3’和MHCclassl啦区至5’一非翻译区(5’一uT)基因Ctid—MHCl5’。最后从草鱼cDNA文库中克隆了MHCclassI全基因。Ctid．MHCI3‘基因片段长1425bp，含q2、q3、TM、CY、终止子、3’