扁桃体淋巴细胞归巢异常与igan发病机制的分析-analysis of the abnormal homing of tonsil lymphocytes and the pathogenesis of igan.docxVIP

独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其 他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切 法律后果。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有 权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和 借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据 库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于保密□ ，在年解密后适用本授权书。不保密□。（请在以上方框内打“√” ）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日前言IgAN 是以 IgA 沉积于肾小球系膜区为主要特征的肾小球肾炎[1，2]，约 39%的 IgAN 患者在 20 年内发展为终末期肾病[3]。扁桃体炎发作后出现血尿、蛋白尿或 尿异常加重是 IgAN 的重要特征之一，IgAN 的发病机制尚不明确，一些报道指出 骨髓内产生 IgA 的细胞增多[4,5]，提出肾小球系膜区沉积的 IgA 可能来源于骨髓 的设想。然而同时抑制粘膜及全身免疫反应后， IgA 型免疫反应减弱;单纯抑制 全身免疫器官的免疫反应后，则不会出现这种现象[6]。这一发现说明肾脏沉积的 IgA 可能来源于粘膜免疫器官。研究发现，与慢性扁桃体炎患者相比，IgAN 患者 扁桃体载脂蛋白 B 信使 RNA 编辑酶催化的多肽 2（APOBEC2）基因表达增加，而 该基因表达产物与粘膜免疫反应增强相关[3]。此外，用未甲基化的脱氧胞苷酸- 脱氧鸟苷寡聚脱氧核苷酸（一种微生物 DNA 样免疫刺激活性物质）刺激扁桃体组 织提取的淋巴细胞后，IgAN 患者扁桃体淋巴细胞 IgA 的释放较对照组增加[7]。 IgAN 患者扁桃体内 IgA 与 IgG 比值失衡，并且该类患者扁桃体淋巴细胞产生 IgA 明显增多[8]。许多 IgAN 患者接受扁桃体切除后，尿异常得以缓解并维持稳定的 肾功能。种种发现表明扁桃体免疫可能在 IgAN 发病机制中起重要作用。淋巴细胞归巢(lymphocyte homing，LH)是淋巴细胞迁移的一种特殊形式， 扁桃体受外来抗原刺激后，外周血淋巴细胞向扁桃体归巢发生一系列变化。淋巴 细胞表面被称为归巢受体（homing receptor, HR)的多种粘附分子，与血管内皮 上相对应的被称为地址素（addressin)的粘附分子相互作用参与介导淋巴细胞归 巢过程。除需要粘附分子及其配体相互作用外，同样需要趋化因子及其受体的作 用。淋巴细胞再循环是人类扁桃体的主要特征，即淋巴细胞离开扁桃体组织流入 外周血，然后重新定位于含有 HEV 的淋巴样组织和黏膜区域。研究表明，IgAN 患者淋巴细胞向扁桃体归巢存在异常。该类患者 HEV 归巢 受体 CD31,CD54 表达增加[9]，外周血前体 IgA1 细胞趋化因子受体 CCR9 消失、CXCR4 表达上调、CCR10 表达下调，致使 J 链阳性 IgA1 型淋巴细胞归巢至扁桃体，从 而导致扁桃体 IgA1 增多[10]。此外，患者外周血 T 淋巴细胞 VLA-4 表达增加[2]。 这些改变可使淋巴细胞向淋巴器官归巢发生紊乱 [2,10]。以往研究显示 IgA 肾病扁 桃体 HEV 内 T、B 淋巴细胞数量增多，则系淋巴细胞异常归巢过程的重要现象[11]。L-选择素（CD62L）、LFA-1(CD18)、VLA-4α(CD49d)是淋巴细胞重要归巢受体，本实验检测这些归巢受体和血管地址素 ICAM-1（CD54）、VCAM-1(CD106)在 IgAN 扁桃体组织表达。材料与方法1 材 料1.1 标本来源本项研究经过当地伦理委员会批准，所得标本均经患者本人同意，10 例非 肾炎慢性扁桃体炎患者（CT）和 10 例伴有慢性扁桃体炎的 IgAN 患者（IgAN 组） 的扁桃体组织取自华中科技大学同济医学院附属同济医院耳鼻咽喉科 2009 年 3月至 2010 年 3 月住院患者。1.2 实验试剂多克隆兔抗 CD18 抗体： 购于北京博奥森公司多克隆兔抗 CD49d 抗体： 购于北京博奥森公司多克隆兔抗 CD62 抗体： 购于北京博奥森公司多克隆兔抗 VCAM-1 抗体： 购于北京博奥森公司多克隆鼠抗 ICAM-1 抗体： 购于北京中杉金桥公司多克隆鼠抗 β-actin 抗体： 购于美国 Sigma 公司辣根酶标记山羊抗兔 IgG： 购于美国 Pierce Biotechnology 公司 辣