现代分离技术——天然活性成分的层析纯化策略.pptVIP

* * 天然活性成分的层析纯化策略 层析方法：正相硅胶 优点：经济、可常压操作、加压可提高效率 局限性：不可逆吸附、使用大量有害有机溶剂、国产硅胶验证文件不健全 层析方法：反相硅胶 优点：常用于检测、少量制备，有硅胶基架的C4，C8，C18以及聚苯乙烯基架的SOURCE介质多种选择，分辨率高。 局限性：成本高，介质昂贵、放大生产困难 层析方法：大孔树脂 优点：常用于组分粗提、流速快、经济、吸附少 局限性：选择性少，验证文件不健全。合成原料及溶剂残留问题；缺乏公认统一的药用标准、条件的规范化、重现性 层析方法：聚酰胺 优点：多用于提纯黄酮、内酯类成分 局限性：流速慢，验证文件不健全 层析方法：超临界萃取 优点：快速、回收率高、CO2成本低、无需处理有机溶剂 局限性：设备成本高，强极性物质提取受限制 层析方法：葡聚糖凝胶 优点：适合含羟基、氨基、羧基、芳香环的苷类、黄酮、多酚、丹宁等。可多次使用 局限性：流速慢，比硅胶更适合亲水性物质，可与硅胶为互补技术。 层析方法：离子交换 优点：适合生物碱、有机酸等的分离。有些阴离子交换介质也适合苷类、皂苷、黄酮纯化，可多次使用 局限性：受制于带电荷物质 纯化平台：生物碱 平台技术：〈PH3的酸水提取—阳离子交换 SP Sepharose HP — 中、高压硅胶反相 生物碱带碱性，在传统的硅胶或氧化铝层析上效果往往不理想。 SP Sepharose HP 载量高、易于直接放大，对生物碱有特殊的选择性，可从酸水粗提物中分离结构近似的十几种生物碱，一步纯化可达60-80%的纯度。 纯化平台：生物碱 中、高压反相层析如Source15RPC或C18硅胶可将纯度提高到90%以上。 Source是以聚苯乙烯为基架的反相介质，可耐受1M强酸强碱，比传统的如反相介质使用范围更宽广，寿命更长。 纯化平台：有机酸 平台技术：〉PH11的碱水提取—阴离子交换 Q Sepharose HP或Sephadex LH 20 — 中、高压硅胶反相 有机酸多成盐，亲水性强。带负电荷，经Q Sepharose HP一步纯化可达50%纯度，然后再上Sephadex LH 20 可至90%以上。 纯化平台：皂苷类 平台技术：〉PH11的碱水提取—阴离子交换 Q Sepharose HP— 中、高压硅胶反相 皂苷同时具有强极性的糖基和弱极性的母核。皂苷含羧基 纯化平台：黄酮苷类 平台技术：水和醇提取—阴离子交换 Q Sepharose FF 去色素— Sephadex LH 20—中、高压硅胶反相 Q Sepharose FF是去处植物色素的有效方法，可对提取物进行第一步纯化， Sephadex LH 20适合精细纯化 纯化平台：黄酮、醌、多酚类 平台技术：水和醇提取— Sephadex LH 20—中、高压硅胶反相 Sephadex LH 20 纯化平台：内酯、萜类 平台技术：水和醇提取—中、高压硅胶反相 管道化的加压硅胶层析可在密闭的环境下操作，大大提高生产速度、重复性、安全性、可控性。