高效液相色谱法同时测定餐具中残留富马酸二甲酯和克霉唑含量.docVIP

高效液相色谱法同时测定餐具中残留富马酸二甲酯和克霉唑含量 　　【摘要】 目的 建立高效液相色谱法同时测定餐具中残留富马酸二甲酯和克霉唑的含量。方法 以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇（30：70，用10%磷酸溶液调节pH值至5.7-5.8）为流动相。结果 富马酸二甲酯和克霉唑在0.5-40μg/mL范围内线性关系良好，该方法中富马酸二甲酯样品回收率分别为94.8%-103.9%，最低检测限为0.1μg/mL，相对标准偏差为0.2%-3.9%；克霉唑的样品回收率分别为98.4%-103.3%，最低检测限为0.2μg/mL，相对标准偏差为0.7%-2.1%。结论 本法操作简便，结果准确，精密度高，具有重要的实际应用价值。 　　【关键词】 富马酸二甲酯；克霉唑；高效液相色谱法；餐具 　　doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.11.799 文章编号：1004-7484（2013）-11-6781-02 　　富富马酸二甲酯（Dimethyl Fumarate），简称为DMF。是美国80年代开发出来的一种新型防霉剂，取名为霉敌，具有低毒（LD大白鼠口服为2240mg/kg）高效、广谱抗菌、安全、化学稳定性好、作用时间长、适用的pH值范围宽等特点，能抑制多种霉菌、酵母菌及细菌，特别对肉毒梭菌和黄曲霉菌有很好的抑制作用。然而有报道称富马酸二甲酯对皮肤产生过敏性伤害（黏膜刺激），长期接触会发生皮肤过敏甚至溃烂，经食道吸入可能会对人体肠道、内脏产生腐蚀性损害，特别是对儿童的成长发育造成极大伤害。自2012年6月4日起，全欧盟限制使用富马酸二甲酯（DMF）。欧盟规定市场上流通的产品或产品零件中富马酸二甲酯（DMF）的含量不应超过0.1mg/kg。 　　克霉唑（Clotrinazole）临床主要供外用，具广谱抗真菌活性，对表皮癣菌、毛发癣菌、曲菌、着色菌、隐球菌属和念珠菌属均有较好抗菌作用，对申克氏孢子丝菌、皮炎芽生菌、粗球孢子菌属、组织浆胞菌属等也有一定抗菌活性。主要用于治疗皮肤霉菌病，如手足癣、体癣、耳道、阴道霉菌病等。 　　目前测定富马酸二甲酯的方法有紫外吸光光度法、液相色谱法、气相色谱-质谱联用法[6]。我国在食品中禁止添加富马酸二甲酯作为防腐保鲜剂，并建立了相应的检验方法。《中国药典》2010年版二部规定采用高效液相色谱法测定克霉唑溶液及软膏中克霉唑的含量测定。本文以甲醇为提取溶剂，以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇为流动相，实现了餐具中富马酸二甲酯和克霉唑的同时测定。该方法简便、快速、灵敏、稳定可靠。建立快速、同时检测多种防腐剂的方法对于食品行业的监管意义重大。 　　1 实验部分 　　1.1 主要仪器与试剂 高效液相色谱仪（配有紫外检测器）：岛津LC-20A；超声波水浴器；有机相滤膜（尼龙）：13mm*0.45μm。甲醇、磷酸二氢钾、磷酸（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）；甲醇（色谱纯）；克霉唑标准物质（中国计量研究院）。餐具由市场抽样所得。 　　1.2 标准物质及样品溶液配制 　　1.2.1 克霉唑储备液 称取克霉唑标准物质约25mg，精密称定，用甲醇充分溶解，并定容至25mL，摇匀，贮存于0-4℃冰箱中。 　　1.2.2 富马酸二甲酯标准储备液 称取富马酸二甲酯标准物质约25mg，精密称定。用甲醇充分溶解，并定容至25mL，摇匀，贮存于0-4℃冰箱中。 　　1.2.3 样品前处理 选取餐厅常规用饭碗，碟子，塑料性饭盒各双份，加10mL甲醇溶液静止15min，然后置于超声波水浴中处理15min。冷却至室温，用醋酸溶液调节pH值至5.7。转移试样溶液至25mL容量瓶中，用水分次淋洗，使完全转移，并用水定容、混匀。溶液经0.45μm有机相滤膜过滤后，用于高效液相色谱仪测定。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件及系统性试验 色谱柱为：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱；流动相为：0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇（30：70，用10%磷酸溶液调节pH值至5.7-5.8）；流速1.0mL/min；柱温30℃；紫外检测器波长215nm；进样量为10μL分别取适应浓度的标准物质溶液、样品溶液及空白，进样分析，结果得到富马酸二甲酯峰形分离度达到1.5以上，其他物质对它几乎无干扰，具体分别。 　　2.2 标准曲线和线性范围 以流动相为溶剂，配制成富马酸二甲酯/克霉唑含量分别为0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、40.0μg/mL的标准系列，在规定的色谱条件下进行测定，富马酸二甲酯/克霉唑标准溶液图谱，见图1，系列标准溶液的液相色谱响应值与浓度的线性关系。测定结果表明，在该浓度范围内，峰面积与浓度呈线性关系，符合定量要求。其标准曲线方程分别为：Y富=5934X富+1224.2，r=0.9