高效液相色谱法测定散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱含量.docVIP

高效液相色谱法测定散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱含量 　　【摘要】目的建立散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱含量的高效液相色谱测定方法。方法样品用超声提取，过滤，取续滤液，采用高效液相色谱法直接测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈：0.1%磷酸溶液=9：87为流动相，流速为1.0ml/min，进样量10μl，检测波长为207nm。结果盐酸麻黄碱的线性范围为2.396-21.564μg/ml，平均加样回收率为99.41%，RSD=0.59%（n=6）。结论此方法准确度较高，可用于测定散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱的含量，为散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱含量测定提供了一种切实可行的方法。 　　【关键词】散痰宁糖浆；高效液相色谱法；盐酸麻黄碱 　　散痰宁糖浆是《卫生部药品标准》中药成方制剂第七册收载的品种，处方为桔梗、远志（制）、桑白皮、氯化铵、盐酸麻黄碱、薄荷脑。[1]是临床用于支气管炎，咳嗽痰多等呼吸道疾病治疗的常用药品。但是标准中没有对处方中的盐酸麻黄碱进行含量测定，《中国药典》2010年版一部对麻黄药材用高效液相色谱法测定盐酸麻黄碱的含量[2]，笔者参考该法测定散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱的含量，结果专属性强、耐用性好、精密度高，认为此法可以测定散痰宁糖浆中盐酸麻黄碱的含量。具体实验方法如下：1仪器与试药 　　SHIMADZU SPD-10AVP型高效液相色谱仪，UV762型双光束紫外分光光度计，FA2004电子分析天平。乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。2检测波长 　　取盐酸麻黄碱对照品的甲醇溶液，在200-600nm波长处进行扫描测定，最大吸收波长为207nm，所以选择检测波长为207nm。3测定条件 　　以乙腈?0.1%磷酸溶液（9：87）为流动相，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流速为1.0ml/min，柱温为23℃。4专属性考察 　　取缺盐酸麻黄碱的全处方量的阴性样品，按上述的含量测定方法进行测定，阴性无干扰。5供试溶液的制备 　　5.1对照品溶液的制备精密称取置五氧化二磷干燥器中减压干燥12小时的盐酸麻黄碱对照品9.9mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取2ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含盐酸麻黄碱7.92μg）。 　　5.2提取溶剂的考察精密量取样品（批号100901）10ml（共三份），分置50ml量瓶中，加50%甲醇、甲醇、乙醇各40ml，超声处理20分钟，分别加50%甲醇、甲醇、乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。按上述色谱条件进行测定，计算，结果以甲醇为提取溶剂，提取效率优于50%甲醇、乙醇，因此选用甲醇为提取溶剂。 　　5.3提取方法的考察精密量取样品（批号100901）10ml，置50ml量瓶中，加甲醇40ml，一份超声处理（功率120W，频率59KHZ）20分钟；另一份置水浴中加热回流20分钟，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。按上述色谱条件进行测定，计算，结果两种方法提取含量测定结果几无差异，因此以上选用方便简单的超声处理进行提取。 　　5.4提取时间的考察精密量取样品（批号100901）10ml（共三份），分置50ml量瓶中，加入甲醇各40ml，分别超声处理（功率120W，频率59KHZ）20分钟、30分钟、40分钟，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，再精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。按上述色谱条件进行测定，计算，结果几种提取时间均能较完全提取，含量测定的结果几无差异，因此提取时间选择为20分钟。 　　综上所述，供试品溶液的制备方法为：精密量取样品10ml，置50ml量瓶中，加入甲醇40ml，超声处理（功率120W，频率59KHZ）20分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，精密量取续滤液2ml，置25ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。6耐用性试验 　　6.1稳定性试验精密量取样品（批号100901）10ml，按以上拟定的供试液的制备方法制备，室温下保存，取对照品溶液及供试品溶液分别于0小时、2小时、4小时、6小时、8小时、10小时，按以上拟定的含量测定方法，分别进样10μl，并以含量计算其RSD值，结果为0.22，可见对照品溶液与供试品溶液在配制后10小时内测定，结果稳定。 　　6.2不同比例的流动相实验曾以乙腈-0.1%磷酸溶液（9：87）、乙腈-0.1%磷酸溶液（10∶90）、乙腈-0.1%磷酸溶液（15∶85）为流动相，流速：1.0ml/min，以SHIMADZUC18柱（5μm，4.6×250mm）为分析柱，柱温