“低温诱导植物染色体数目变化”实验改进和分析.docVIP

“低温诱导植物染色体数目变化”实验改进和分析 　　摘要：针对“低温诱导植物染色体数目变化”实验中存在的低温诱导处理的时间究竟多长最合适等问题，开展一系列的实验研究，发现4℃条件下培养根尖48小时～72小时，再经常温25℃、24小时培养后用于实验制片的方案，既有利于实验的准备和开展，又可获得较为理想的实验效果。在制片过程中，本文对染色方法进行了改进，获得了较为清晰的染色体数目变化的图片，使学生对于细胞中染色体数目变化有一定的感性认识。同时提出采用菊科单冠毛属植物进行细胞分裂连续观察的设想和展望。 　　关键词：低温诱导；时间长度；醋酸分色；图像 　　人民教育出版社与河北少年儿童出版社出版的《普通高中课程标准实验教科书?生物?必修2?遗传与进化》（以下简称人教版教材和河北版教材）中均有“低温影响染色体数目变化”的探究实验，但侧重点不同。人教版教材着重于学习诱导植物染色体数目变化的方法以及理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制，教材中有方法与步骤的指导。河北版教材则侧重于探究“低温是否能引起染色体数目变异”，教材中没有方法和步骤的说明，需要学生在教师的指导下进行自主性更强的设计和探究。虽然这两种版本教材着力点不同，但是探究实验的原理、过程和方法基本上是相同的。 　　一、探究实验存在的困难 　　“低温诱导植物染色体数目变化”探究实验在操作上有以下三个困难；一是若按教材中的做法，将洋葱进行4℃低温诱导培养36小时，时间安排上比较尴尬；二是在目前中学生物学实验能力和实验条件下，无法对经过低温诱导后的植物细胞中染色体数目是否发生了变化进行数量上的计算；三是洋葱鳞茎盘生根数量较少且不整齐，很难满足班生数较多时的实验需求，增加了实验成本。 　　二、探究实验改进的方法 　　要使经过低温诱导后处于分裂相的根尖细胞的比例有所提高，并且有利于观察与比较染色体数目的变化，应从低温诱导的时间长短上进行探究，寻找一个较为满意的诱导时长。其次，虽然无法对细胞中染色体数目进行准确的量化计数，但是，如果能够拍下较为清晰的图片，就能够利用图像进行感性的对比。 　　1.改进材料 　　用大蒜代替洋葱进行实验。由于每个大蒜瓣可生长出较多的根尖且发根较整齐，相同重量的大蒜瓣所长的根的数目远远多于洋葱所长的根的数目，有利于实验材料的准备，节省实验成本。 　　大蒜根的培养方法如下。 　　选取健壮的大蒜，在发根前，先放入冰箱4℃冷藏室一周，可打破其休眠期。取出后剥去枯皮，将大蒜放在装满清水的小烧杯上，或将3～4个蒜瓣用牙签并排串起，放在盛有清水的烧杯上，以水浸没大蒜底部为宜。把该装置放在温暖的地方培养3～4天。如果室温较低，可放入恒温25℃左右的培养箱中培养。每天换水1～2次。待大蒜根长出约1cm左右时，进行低温诱导。 　　2.改进低温诱导 　　将5组长出1cm根的大蒜连同培养装置，一组置于25℃室温中，其余4组放入冰箱4℃冷藏室内，分别进行低温诱导培养24、36、48、72小时。而后制片、观察并拍摄照片。 　　将4℃条件下培养48小时的装置移到25℃条件下培养24小时，制片、观察及拍摄照片。 　　3.改进染色方法 　　教材中使用的染色剂是改良苯酚品红，其配制方法复杂、步骤繁琐，且药品的毒性较强，不宜在学生分组实验中使用。因此，我们弃繁就简，坚持使用龙胆紫作为染色剂，将医用的紫药水稀释5倍即配成粗制1%龙胆紫溶液。经实验发现，如果单纯用1%龙胆紫溶液染色，染色效果不很理想。通过查阅资料和实践摸索，按如下方法稍加改进，即可获得更好的染色效果。即在制片时，用龙胆紫染色5分钟后，再加1滴20%醋酸进行分色，约3～5秒后，用清水缓流冲洗3遍。 　　三、探究实验改进的结果与分析 　　经过上述改进，做出来的装片在显微镜下观察时看到的染色体图像更为清晰，如图1――图7是在不同温度中处理不同时间后的大蒜根尖有丝分裂的照片。 　　1.对人教版教材中“4℃诱导培养36小时”的分析 　　36小时的长度在时间安排上不太切合实际。如果第一天9∶00将大蒜培养装置放入4℃低温，则实验时间要安排在第二天的21∶00。这个时间点学生不可能来上实验课。如果第一天21∶00将大蒜培养装置放入4℃低温，则实验时间可以安排在第三天的9∶00开始，但是对于实验教师来说，晚上21∶00还要在实验室工作，太过辛苦。 　　此外，4℃诱导培养36小时后，制片中绝大多数细胞处于前期，染色体的形态还不清晰，处于中期或后期的细胞非常少，难以观察到染色体数量变化的情况，如图3所示。 　　因此，建议将4℃诱导培养的时间增加到48小时～72小时，一是便于实验的开展，二是实验的效果也较为明显，如图4～图6，处于分裂中期或后期的细胞数量多于4℃、36小时的诱导结果，从图像的对比上，较容易发现染色体数量增多了。 　　2.对于低温诱导染色体数