中国特有珍稀濒危水生植物海菜花大孢子发生及雌子体发育.docVIP

中国特有珍稀濒危水生植物海菜花大孢子发生及雌配子体发育 　　摘要：用石蜡切片法对我国特有珍稀濒危水生植物海菜花的大孢子发生及雌配子体的发育过程进行解剖学研究，探讨其繁殖生物学特性。结果表明：海菜花雌蕊为3心皮，每心皮胚珠多数，胚珠倒生，双珠被，厚珠心。功能大孢子位于珠孔端，胚囊发育蓼型。大孢子发生和雌配子体发育情况基本正常。此外，还能观察到雌花内有雄蕊退化的痕迹。 中国论文网 /1/viewhtm　　关键词：海菜花；大孢子；发生；雌配子体；雌花形态结构；发育形态；繁殖；生物学特性；胚胎学特征；雄蕊退化 　　中图分类号： S6823201文献标志码： 　　文章编号：1002-1302（2017）16-0229-02 　　收稿日期：2017-04-09 　　基金项目：国家自然科学基金（编号：3136O065）。 　　作者简介：翟书华（1963―），男，教授，从事资源植物学与生理生态学的教学和研究。E-mail：937701466@qqcom。 　　通信作者：殷根深，博士，实验师，主要从事植物学教学和研究。E-mail：252351015@qqcom。 　　海菜花[Ottelia acuminata（Gagnep） Dandy]为水鳖科（Hydrocharitaceae）水车前属植物，别称异叶水车前、龙爪菜、海菜等，多年生大型沉水植物，是中国特有的国家三级重点保护珍稀濒危水生植物[1-2]。曾经广泛分布于中国西南、华南诸省，特别是在广西西南部高原台地的河溪与云南湖泊中能形成稳定的沉水植物群落。可供观赏、食用、药用，也可作为鸟类、鱼类等动物的饲料，另外还可以用于环境监测[3-4]。但是，由于水体污染、干旱、水位下降、人类的过度采捞等，导致海菜花的数量急剧下降[4]。近年来，海菜花属植物在分类学、生态学、核型研究等方面的报道不断增多[5-10]，但是对海菜花有性生殖过程中大孢子的发生和雌配子体的发育未见报道。本研究对海菜花大孢子的发生和雌配子体的发育情况进行显微观察，从生殖生物学的角度探讨海菜花是否存在生殖障碍，为其濒危机制、繁育和保护研究提供理论依据。 　　1材料与方法 　　11材料的采集与栽培 　　活体材料采自于云南省鹤庆县黑龙潭（编号为HQH-1，100°10′044″E、26°35′400″N，海拔2 192 m）和剑川县金华乡格美江（编号为JCJ-1，96°56′590″E、26°31′134″N，海拔 2 140 m），移栽到昆明学院生命科学与技术系实验楼中，栽培基质为营养土（3份沙 ∶6份红壤土 ∶1份腐殖质土 ∶005份有机肥，均为质量比，本试验所用单位为kg），沉入玻璃缸中，定期人工加水、换水、施肥、打捞藻类、螺类和换土等。 　　12方法 　　在开花期间采集雌花，根据花蕾大小分组，清洗后用FAA固定，置于4 ℃冰箱中保存备用。在解剖镜下?Υ苹?进行解剖，观察其形态特征，并记录拍照。铁钒-苏木精整体染色，石蜡切片法制片，切片厚度8～12 μm，中性树胶封片，徕卡数码显微镜（DM2500）下观察并拍照。 　　2结果与分析 　　21雌花的形态结构 　　海菜花为单性花，雌雄异株，据笔者20多年的观察，只要气温适宜即可常年开花。每个雌花花序有3枚绿色总苞，佛焰苞中有2～4枚雌花，雌花有花萼3枚，绿色披针形，花瓣3枚，长1～35 cm，基部黄色，上部白色，倒心形，花柱3枚，橙黄色，分2叉，长约14 cm，退花雄蕊3枚，黄色，线形。雌蕊3心皮3室，子房下位，呈狭长的不规则三棱柱状，子房内有3列倒生的胚珠，胚珠多数。 　　22大孢子发生 　　海菜花的胚珠着生于心皮的侧膜胎座（图1-a）上，子房壁内表皮下的细胞平周分裂，产生胚珠原基（图1-a），胚珠原基继续分裂分化，顶端发育成珠心，基部发育成珠柄（图1-b）。珠心表皮细胞下分化出1个孢原细胞，孢原细胞不断发育，体积逐渐增大，细胞核大而明显，易区别于周围的珠心细胞，孢原细胞经过平周分裂形成周缘细胞和造孢细胞，周缘细胞经过平周分裂和垂周分裂形成珠心组织，造孢细胞发育成1个胚囊母细胞（图1-c），与周围的珠心细胞、表皮细胞相比，其体积较大、细胞质浓、细胞核大，胚囊母细胞经过2次分裂形成4个细胞，其中1个为功能性大孢子，功能性大孢子逐渐发育成单核胚囊（图1-d），随即进入雌配子体发育。在大孢子发生的过程中，内外珠被细胞也在不断分裂发育并逐渐包围珠心，最后生长到胚珠顶端，与胚珠顶端愈合在一起，并且在愈合处形成珠孔，为成熟的花粉粒进入胚珠内与卵细胞结合提供通道。 　　23雌配子体发育 　　单核胚囊经过1次分裂，形成2个核，2个核分别反方向向胚囊两端移动， 形成二核胚囊（图1-e），二核胚囊不断发 　　育成熟，再次分裂为四核胚囊（图1-f），四核胚囊发育成熟后再次进行分裂，形成