不同杀菌剂对苹果霉心病菌室内毒力测定.docVIP

不同杀菌剂对苹果霉心病菌室内毒力测定 　　摘要：为筛选防治苹果霉心病高效、低毒、低残留的药剂，采用生长速率法测定了6种杀菌剂对苹果霉心病菌（粉红单端孢菌，Trichothecium roseum Bull）的室内毒力。结果表明，6种药剂对苹果霉心病菌菌丝生长的抑制效果不同，涂干剂EC抑菌效果最好，其EC50为3.715 μg/mL；78%波尔?锰锌WP、70%丙森锌WP及10%苯醚甲环唑WG的抑菌效果差别不大，EC50在19.011～87.700 μg/mL之间；80%代森锰锌WG EC50为7.161 μg/mL，抑菌效果也较好；75%百菌清WP的抑菌效果较差，EC50为3 169.567 μg/mL。 　　关键词：苹果霉心病；粉红单端孢菌；杀菌剂；毒力测定 　　中图分类号：S436.611 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）06-1309-03 　　中国是传统的苹果生产大国，不论是苹果的栽培面积还是产量都稳居世界第一，自20世纪60年代以来，苹果产量逐年增加，对经济发展起到了良好的促进作用[1]。苹果霉心病是由粉红单端孢菌（Trichothecium roseum Bull）引起的一种真菌性病害，多发生于中国辽宁、山东、山西、陕西、四川、北京等地区，引起生长期落果和贮藏期果实腐烂，发病严重时，果实可见褐色水渍状、不规则的湿腐斑 块，最后全果腐烂，果肉味苦，严重影响苹果的产量及商品性[2-5]。调查发现，贵州省贵阳地区已有该病发生，随着贵州山区农业开发和产业结构调整，苹果种植面积逐年扩大，霉心病也随之加重[6]。有效控制霉心病的发生与危害已成为当前苹果种植亟待解决的重要课题，有必要进行该病的防治技术研究。为筛选出高效、低毒、低残留的防治药剂，进行了6种药剂对苹果霉心病菌的室内毒力试验。 　　1 材料和方法 　　1.1 供试药剂 　　供试药剂为6种杀菌剂，详情见表1。 　　1.2 培养基 　　PDA培养基，配方：去皮马铃薯200 g，琼脂20 g、葡萄糖15 g、水1 L；含药培养基，将杀菌剂用无菌水稀释后与PDA培养基混合均匀，制成系列浓度梯度含药平板培养基[7，8]，各处理药剂浓度见表2。 　　1.3 供试菌 　　2011年8月采集贵州省贵阳市白云区、花溪区的感病苹果，采用实验室常规方法分离纯化[9]，得到供试菌。经形态学鉴定及DNA测序，确定供试菌为粉红单端孢菌，属半知菌亚门（Deuteromycotina） 肉座菌目（Hypocreales）。 　　1.4 毒力的测定 　　无菌条件下将供试菌菌株接种于PDA培养基上，放入温度为25 ℃的培养箱中培养。10 d后用打孔器在菌落边缘、菌丝生长旺盛处制作菌饼，菌饼转接到含药PDA培养基上，菌丝一面接触培养基。以不加药剂而加等量无菌水的PDA培养基为对照（CK），每个处理设3次重复。25 ℃恒温培养6 d后用十字交叉法测量菌落直径，取平均值，计算抑制率。 　　抑制率=（对照菌落直径-处理菌落直径）/（对照菌落直径-菌饼直径）×100%。 　　以处理浓度（μg/mL）值的对数值为横坐标（x）、抑制率值为纵坐标（y）求出毒力回归方程，并计算抑制中浓度（EC50）及相关系数，以上过程通过SPSS软件辅助完成[10]。 　　2 结果与分析 　　2.1 杀菌剂对苹果霉心病菌的抑制作用 　　6种杀菌剂对苹果霉心病菌菌丝的抑制作用测定结果（表2）表明，在设定的药剂浓度范围内，供试菌菌丝的生长均受到不同程度抑制。从抑制率变化情况来看，随着药剂浓度增加，抑制率增大；各药剂中，百菌清浓度较大，但抑制率却不大；涂干剂处理浓度较小，抑制效果整体较好。整体上，各药剂都表现出处理浓度与抑制率呈正相关关系。 　　2.2 杀菌剂对苹果霉心病菌的毒力比较 　　通过不同药剂的毒力回归方程、EC50和相关系数比较各杀菌剂对苹果霉心病菌的毒力（表3）可知，6种供试药剂的浓度与抑菌率的相关性均达显著水平，处理浓度值的对数值和抑制率值呈线性相关。6种药剂对苹果霉心病菌菌丝生长的抑制效果不同，利用EC50来比较杀菌剂对供试菌的毒力，可知涂干剂抑菌效果最好，EC50达到3.715 μg/mL；百菌清抑菌效果差，EC50为3 169.567 μg/mL；波尔?锰锌、丙森锌及苯醚甲环唑的抑菌效果差别不大，EC50为19.011～87.700 μg/mL；代森锰锌抑菌作用也较强，EC50为7.161 μg/mL。 　　3 小结 　　毒力试验结果表明，6种杀菌剂对苹果霉心病菌菌丝生长均有抑制作用，但作用大小有所不同，EC50由大到小依次为百菌清、丙森锌、波尔?锰锌、苯醚甲环唑、代森锰锌、涂干剂；6种药剂中，涂干剂的抑菌效果明显优于其他5种，75%百菌清WP的抑菌效果最差，其他4种药剂抑菌效果介于两者之间。试验