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不同枣品种RAPD分析
不同枣品种RAPD分析 摘要:采用RAPD分子技术对11个枣(Ziziphus jujube Mill.)品种进行遗传关系鉴定。结果表明,12个引物共扩增出70条谱带,平均每个引物扩增出5.83条;其中多态性条带57条,多态性比例为81.4%。聚类分析结果表明,11个品种中,野枣与其他10个品种亲缘关系较远,其次是台湾青枣;龙枣与沾化冬枣、胎里红与以色列枣、灰枣与酸枣之间亲缘关系较近。 关键词:枣(Ziziphus jujube Mill.);RAPD;遗传多样性 中图分类号:S665.1;Q7 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2014)01-0114-02 RAPD Analysis of Different Ziziphus jujuba Mill. Varieties DIAO Yi1,2,HAN Hong-bo1,JIANG Jian1,ZHENG Yi1 (1.College of Biological and Chemical Engineering, Panzhihua University, Panzhihua 617000, Sichuan, China; 2.School of Life Science and Technology, University of Electronic Science and Technology of China, Chengdu 610000,China) Abstract: The genitic relationships of eleven Ziziphus jujuba Mill. varieties were studied by RAPD technique. 70 DNA fragments were amplified with 12 random primers. The polymorphic DNA fragments were 57, accounting for 81.4% of 70 fragments. Cluster analysis showed that Yezao had farther relationship with other ten Ziziphus jujuba Mill. varieties, Taiwanqingzao was the next variety. There were close relationships between Longzao and Zhanhuadongzao, Tailihong and yiseliezao, Huizao and Suanzao. Key words: Zizyphus jujuba Mill.; RAPD; genitic diversity 收稿日期:2013-05-20 基金项目:攀枝花市科技局项目[2012CY-S-22(9)] 作者简介:刁 毅(1975-),男,四川南部人,副教授,硕士,主要从事植物病理方面的研究,(电话电子信箱)diaoy163@163.com。 枣(Ziziphus jujube Mill.)属于鼠李科(Rhamnaceae)枣属植物,是经济价值比较高的植物。枣营养丰富,含有丰富的多糖、蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、有机酸及微量元素。枣具有较好的药理作用,具有增强睡眠、保护肝脏、提高免疫力、调节内分泌等作用。枣中还含有丰富的安全无毒天然色素,广泛用于食品、医药、化妆品等方面[1]。我国枣树品种繁多,目前栽培品种达700余个,但在枣的分类中多以形态、用途、分布等进行分类命名,并且,传统外观形态鉴别难以有效鉴别枣树。 通过采用分子标记技术鉴别枣树,可以快速鉴别枣树品种。RAPD分子标记技术即随机扩增多态性技术,是以DNA为模版,利用10个核苷酸引物进行基因组DNA PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳将DNA条带分离显示出来,以检测其多态性[2]。 1 材料与方法 1.1 供试材料 供试材料有:安国枣、龙枣、沾化冬枣、野枣、胎里红、灰枣、酸枣、京39号、新京14号、以色列枣、台湾青枣,采自攀枝花市银江安国枣业有限公司和干热河谷特色生物资源种植园。采集幼嫩叶片后,放于冰盒中带回实验室,-80 ℃冰箱保存备用。 1.2 DNA的提取 采用改进的CTAB法,从幼嫩叶片中提取基因组DNA[3-5]。 1.3 RAPD-PCR反应体系 扩增所用的40个引物,由北京三博远志生物技术有限责任公司合成。PCR反应体系为25 μL,其中包括25 mmol/L MgCl2 2 μL,10×PCR缓冲液2.5 μL,10 ng/μL
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