丹参酮ⅡA下调凋亡抑制蛋白XIAP诱导人肝癌细胞凋亡研究.docVIP

丹参酮ⅡA下调凋亡抑制蛋白XIAP诱导人肝癌细胞凋亡研究 　　【摘要】 目的：探讨丹参酮ⅡA对肝癌细胞中凋亡抑制蛋白XIAP的影响。方法：通过MTT实验、流式细胞术、细胞形态观察检测丹参酮ⅡA对细胞增殖和凋亡的影响，通过蛋白免疫印迹的方法检测丹参酮ⅡA对细胞中凋亡抑制蛋白XIAP、凋亡蛋白caspase-3以及PARP蛋白的影响。结果：MTT、细胞形态结果显示丹参酮ⅡA对SMMC-7721细胞的生长抑制作用成时间和剂量依赖性，免疫印迹结果显示，0.5 μg/mL丹参酮ⅡA作用肝癌细胞24 h后，caspase-3前体、凋亡抑制蛋白XIAP表达明显下调，活化的caspase-3、剪切形式的PARP含量显著增加。结论：丹参酮ⅡA下调凋亡抑制蛋白XIAP，活化caspase-3，促进PARP剪切诱导肝癌细胞凋亡。 　　【关键词】 丹参酮ⅡA； 肝癌； 凋亡； XIAP 　　【Abstract】 Objective：To investigate the effect of inhibitor of apoptosis protein XIAP in hepatocellular carcinoma cells treated with Tanshinone ⅡA.Method：Effect of Tanshinone ⅡA on cell proliferation and apoptosis were determined by MTT test，flow cytometry and cell morphology observation.The effects of Tanshinone ⅡA on inhibitor of apoptosis protein XIAP，apoptosis related proteins procaspase-3 and PARP protein in cells were measured by Western blot.Result：MTT，cell morphology results showed that Tanshinone ⅡA inhibited the growth of SMMC-7721 cells in a dose and time dependent manner，Western blotting results showed that 0.5 μg/mL tanshinone ⅡA in hepatocellular carcinoma cells after 24 h，Caspase-3 precursor，inhibitor of apoptosis protein XIAP expression were down regulated，the content of PARP，caspase-3 splicing activation increased significantly.Conclusion：Tanshinone ⅡA can down regulate XIAP protein，activate caspase-3 and promote PARP shear，and induce apoptosis of hepatocellular carcinoma cells. 　　【Key words】 Tanshinone ⅡA； Hepatocellular carcinoma； Apoptosis； XIAP 　　First-author’s address：The People’s Hospital of Xinyu City，Xinyu 338000，China 　　doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2014.22.004 　　肝癌属世界上的较为常见的恶性肿瘤之一，在成人中发病率较高，约占80%左右，数据显示，其5年存活率在7%左右，每年约60万人死于肝癌，严重影响人们的健康。近年来，中药治疗肿瘤，尤其是在诱导肿瘤细胞凋亡方面的研究，成为医学研究的重点方向。寻求诱导肿瘤细胞凋亡的中药提取物逐步成为当前肿瘤治疗的热点和重点。丹参酮ⅡA是中药丹参中提取出来的有效成分，在抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞分化、促进细胞凋亡方面有着很好的效果，从而达到抗癌的效果[1]，但是其具体作用机制仍然不清楚。X相关凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP）是细胞中重要的凋亡抑制因子，其过度表达往往导致肿瘤的发生[2]。近年来研究表明，XIAP在肝癌细胞中表达明显升高，并且与肝癌转移、耐药以及复发密切相关[3]。因此，XIAP已经成为肝癌治疗的靶点分子。本研究工作中，笔者