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秸秆生物菌肥对保护地土壤微生物和土壤酶活性影响 　　摘要：对朝阳市喀左县蔬菜保护地用秸秆覆盖进行栽培定位试验，未覆盖秸秆及未加菌肥的土壤作为对照（CK）；只覆盖秸秆未加生物菌肥的土壤为1#；覆盖秸秆同时加生物菌肥的土壤为2#，每隔一定时间采集土壤样品。试验结果表明：土壤中细菌数量最多，其次是真菌数量。土壤微生物数量： 2#1#CK；土壤过氧化氢酶、转化酶、脲酶和碱性磷酸酶活性：2#1#CK，这几种酶的活性与土壤微生物的数量呈正相关。 　　关键词：蔬菜保护地；秸秆覆盖；生物菌肥；土壤微生物；土壤酶活性 　　中图分类号：S144文献标识号：A文章编号：1001-4942（2013）01-0107-04 　　作物秸秆是作物的主要组成部分，其各种营养元素含量也较高。焚烧秸秆不仅浪费资源、污染环境、妨碍交通 ，而且对土壤生态系统造成直接破坏，使土壤有机质含量明显下降，土壤微生物数量显著减少，久而久之必然造成土壤板结，肥力下降，土壤生态系统恶化，作物产量下降。而国内外实验和实践都证明了秸秆还田既有利于更新土壤有机质，保持和提高土壤有机质含量，又可增加土壤中营养元素的储量，促进土壤中某些营养元素的有效供应，还可改善土壤的孔隙、团聚、坚实性等物理性质，提高土壤微生物生物量及增强各种土壤酶的活性，使作物较好较快地生长，提高作物的产量。 　　土壤酶是一种具有蛋白质性质的高分子生物催化剂，对土壤中各种有机物、无机物质转化过程起催化作用。土壤酶活性是指土壤中胞外酶催化生物化学反应的能力，常以单位时间内单位土重的底物剩余量或产物生成量表示。它是评价土壤生物活性和土壤肥力的重要指标，其活性的增强能促进土壤的代谢作用，从而使土壤养分形态发生变化，提高肥力，改善土壤性质。研究长期施肥条件下土壤酶活性，可侧面了解土壤生产力的变化趋势，以往研究多数注重土壤酶与土壤理化性质的关系，而对涉及土壤生物学特性的土壤酶活性动态变化的研究报道相对较少。朝阳地区的土壤为半干旱地区黑土，土壤酶测定以磷酸酶、转化酶、脲酶、过氧化氢酶活性可作为指示其肥力水平的酶活性指标 　　尽管对土壤变化高度敏感，土壤微生物成分经常被忽视。实际上，土壤生态系统的功能主要由土壤微生物机制所控制，土壤生物是目前可用的最敏感的生物标记之一，在能够精确地测定土壤有机质变化之前，微生物群体动态是土壤微妙变化的最好证明。所以，土壤微生物参数将很有潜力成为土壤生态系统变化的预警及敏感指标。因此，研究土壤微生物与土壤酶活性之间的关系非常有必要。1材料与方法 　　11试验材料 　　111样品土样采自喀左县蔬菜保护地，种植作物为茄子。在定植作物前，挖沟、放秸秆、撒菌肥，覆盖20 cm的土，之后定植作物，15天左右取一次土样。取样采用5点法，深度为20～30 cm，风干后过20目筛备用。未覆盖秸秆及未加菌肥的土壤作为对照；只覆盖秸秆未加菌肥的土壤为1#；覆盖秸秆同时加菌肥的土壤为2#。 　　112仪器与药品仪器：水浴摇床：SHZ-82（金坛市华龙试验仪器厂）：可见分光光度计：T6（北京普析通用公司）；药品：柠檬酸、苯酚钠、高锰酸钾、安替比啉等，均为分析纯。 　　12试验方法 　　121土壤微生物数量的测定采用稀释平板涂布法进行细菌和真菌的菌数检测。细菌培养采用牛肉膏蛋白胨培养基，真菌采用马丁孟加拉红培养基。 　　122土壤酶活性的测定采用高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶活性；用苯酚钠比色法测定脲酶活性；用DNS比色法测定转化酶活性，用磷酸苯二钠比色法测定碱性磷酸酶活。 　　①土壤脲酶活性测定 　　标准曲线绘制：吸取配制好的氮溶液（01 mg/ml）10 ml，定容至100 ml吸取1，3，5，7，9，11，13 ml移至50 ml容量瓶，加水至20 ml，再加入4 ml苯酚钠，混合，加入3 ml次氯酸钠，充分摇荡，放置20 min，用水稀释至刻度。将着色液在紫外分光光度计上于578 nm处进行比色测定，以标准溶液浓度为横坐标，以光密度值为纵坐标绘制曲线图。 　　样品测定：称取5 g过1 mm筛的风干土样于100 ml容量瓶中，加入1 ml甲苯并放置15 min；加入10%尿素溶液10 ml和柠檬酸缓冲液（pH 67）20 ml，混合均匀，放入37℃恒温箱中，培养24 h；用38℃水定容，过滤；吸取2 ml滤液于50 ml容量瓶中，加入10 ml蒸馏水，充分振荡，然后加入苯酚钠4 ml，仔细混合，再加入次氯酸钠3ml，充分摇荡，放置20 min，用水稀释至刻度，溶液呈现（靛）酚的蓝色；于578 nm处进行比色测定，同时设无土对照及无基质对照。 　　②土壤碱性磷酸酶活性的测定 　　酚标准曲线绘制：分别取1、3、5、7、9、11和13 ml稀释的酚工作液（10 μg/ml）于50 ml容量瓶中，分别加入蒸馏水20 ml，再加入