哮喘分期序贯治疗对大鼠气道重构及过敏性气道炎症影响.docVIP

哮喘分期序贯治疗对大鼠气道重构及过敏性气道炎症影响 　　 　　[摘要] 目的 研究哮喘分期序贯治疗对大鼠哮喘模型气道重构及过敏性气道炎症的作用。 方法 56只SD大鼠随机分成正常组、哮喘组、序贯治疗1组、序贯治疗2组、序贯治疗3组、布地奈德组、孟鲁司特钠组，每组8只，除正常组外，其余各组均以卵蛋白（OVA）辅以氢氧化铝为佐剂于第1、8、15天注射致敏，22 d后隔天雾化吸入OVA 8周激发哮喘，建立哮喘模型。从实验第8天开始，给药组序贯治疗1组急性期麻杏二陈汤灌胃；序贯治疗2组急性期麻杏二陈汤灌胃，缓解期胃饲金水六君煎加减；序贯治疗3组急性期麻杏二陈汤灌胃，缓解期胃饲金水六君煎加减方，稳定期胃饲六味地黄颗粒；布地奈德组大鼠激发后雾吸沙丁胺醇，缓解期和稳定期雾吸布地奈德；孟鲁司特钠组激发后雾吸沙丁胺醇，缓解期和稳定期胃饲孟鲁司特钠；哮喘模型组以生理盐水胃饲代替，干预7周后观察实验大鼠全血白细胞总数、嗜酸性粒细胞计数，支气管平滑肌层、上皮下胶原、内管壁的厚度，肺组织羟脯氨酸含量。 结果 ①大鼠肺支气管病理学观察表明哮喘大鼠支气管平滑肌层、上皮下胶原、内管壁厚度[（27.87±0.81）、（9.11±0.58）、（39.00±3.68）μｍ]均较正常组[（10.76±0.67）、（3.37±0.42）、（20.40±2.85）μｍ]明显增厚，肺组织羟脯氨酸含量[（11.50±3.81）mg/g]较正常组[（5.71±0.80）mg/g]明显增高，差异均有统计学意义（P = 0.00），表明哮喘时存在气道重构。②序贯治疗1、2、3组、布地奈德组及孟鲁司特钠组对大鼠支气管平滑肌层、上皮下胶原、内管壁厚度、肺组织羟脯氨酸含量、全血白细胞总数及嗜酸性粒细胞计数均比哮喘模型对照组低，差异均有统计学意义（P 　　[Key words] Bronchial asthma; Airway remodeling; Staging sequential; Experimental research 　　支气管哮喘（简称哮喘）是由多种细胞包括气道炎症细胞、结构细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病[1]，是最常见的慢性疾病之一。支气管哮喘不仅存在气道炎症，而且还可发生气道结构的改变，即气道重构。气道重构是导致哮喘患者不可逆性气流阻塞及持续性非特异性气道高反应性（AHR）的重要原因[2]。为探讨运用中医温肺化痰-化痰养阴-滋阴补肾法分期序贯治疗对抑制哮喘气道炎症与阻止哮喘气道重构的作用，笔者对大鼠哮喘模型采用麻杏二陈汤加减方、金水六君煎加减方和六味地黄丸加减方进行分期序贯治疗，观察其对致敏哮喘大鼠全血中白细胞、嗜酸性粒细胞的数量、肺组织羟脯氨酸含量和支气管肺组织病理学改变情况的影响。结果报道如下： 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物 　　选用3～4周龄正常健康SD大鼠56只，雄性，体重（100±20）g，SPF级，广东省医学实验动物中心提供。动物许可证号：SCXK（粤）2008-0002。 　　1.2 药物 　　中药采用江阴天江药业有限公司生产的免煎中药饮片颗粒剂，其中麻杏二陈汤加减方由炙麻黄、杏仁、射干、僵蚕、莱菔子、细辛、陈皮、法半夏、云茯苓、甘草组成，并按5∶8∶8∶6∶8∶2∶4∶6∶8∶6比例配伍；金水六君煎加减方由当归、熟地、陈皮、法半夏、云茯苓、莱菔子、杏仁、射干、甘草组成，并按6∶10∶4∶6∶8∶8∶8∶8∶6 比例配伍；六味地黄丸加减方由熟地黄、山茱萸、山药、泽泻、牡丹皮、白茯苓组成，并按8∶4∶4∶3∶3∶3比例配伍。各处方中药颗粒均分别用温开水调制成每毫升含生药1g的药液备用。孟鲁司特钠片（4 mg/片），由杭州默沙东制药有限公司分装，批号：B120718；布地奈德雾化混悬液（1 mg/2 mL），由澳大利亚阿斯利康有限公司生产，批号：LOT314902。吸入型硫酸沙丁胺醇溶液（5 mg/mL），由葛兰素史克集团生产，批号：C589099。 　　1.3 动物分组及处理 　　运用Excel软件[3]将56只大鼠按体重进行分层随机区组设计，随机分为序贯治疗1组（A1组）、序贯治疗2组（A2组）、序贯治疗3组（A3组）、孟鲁司特钠组（M组）、布地奈德组（B组）、哮喘模型组（X组）、正常对照组（Z组），每组8只。于第1、8、15天，X组、A1组、A2组、A3组、M组和B组各组每只大鼠腹腔注射10%卵清白蛋白（OVA）抗原溶液由美国Sigma公司提供，批号：A5253-10 g；氢氧化铝（分析纯）由天津市博迪化工有限公司生产，批号1.0 mL致敏，正常对照组予生理盐水1.0 mL腹腔注射[4]。于实验第8天即第2次致敏的同一天开始，A2组隔天胃饲金水六君煎加减方20 g/（kg?d）；A3组隔天胃饲六味地黄颗粒