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特发性血小板减少性紫癜患者血小板研究进展 　　摘要：特发性血小板减少性紫癜是一组免疫介导的血小板过度破坏的出血性疾病,是临床上最常见的出血性疾病,目前其发病机制和实验室诊断方法仍是国内外研究重点，本文就其现有的特殊实验室诊断技术作出综述。 　　关键词：ITP；实验室诊断；自身抗体；蛋白组学特发性血小板减少性紫癜(Idiopathicthrombocytopenicpurpura，ITP)是一组免疫介导的血小板过度破坏的出血性疾病，以广泛皮肤出血及内脏出血、血小板减少、骨髓巨核发育障碍、血小板生存时间缩短及血小板膜糖蛋白特异性自身抗体出现为特征[1]。由于ITP早期并无特征性表现，且缺乏特异性的实验室诊断方法，当前, ITP的诊断主要依据临床表现和骨髓检查 [2]。因此，ITP的早期诊断一直是医学界的难题。近年来，国内外学者试图通过检测ITP患者的血小板来研究建立ITP的实验室诊断方法，而血小板蛋白组学方法更是近年来的研究热点。本文拟就近几年针对ITP患者血小板的最新研究作一综述。 　　1ITP概述 　　 ITP是临床最为常见的出血性疾病, 欧美国家统计年发病率为(5～20)/10万[2],而我国目前尚缺乏准确流行病学资料，其诊断依据（ICD-10）是：①广泛出血累及皮肤、黏膜及内脏；②多次化验血常规血小板计数减少；③脾脏不大或轻度增大；④骨髓巨核细胞数量增多或正常，伴有成熟障碍；⑤具备以下五项之中一项者：⑴泼尼松治疗有效；⑵脾切除治疗有效；⑶PAIg阳性；⑷PAC3阳性；⑸血小板生存时间缩短；⑥排除继发性血小板减少症。ITP的病因及发病机制迄今未明，目前研究多认为其与体液免疫[2-4]、细胞免疫[5,6]有关。 　　2ITP患者的血小板抗体 　　50%~70%的 ITP患者血浆和血小板表面都可以检测到血小板膜糖蛋白特异性的自身抗体。目前认为自身抗体致敏的血小板被单核巨噬细胞系统过度吞噬破坏是ITP发病的主要机制。正常血小板平均寿命为7~11d，而ITP患者血小板的寿命仅40~230min。因为脾脏含有大量的巨噬细胞，可产生高浓度的抗血小板抗体，且血流缓慢可阻留抗体被覆的血小板，因此脾脏成为血小板破坏的主要场所。肝脏和骨髓也是血小板破坏的场所。慢性ITP血小板破坏是由于抗血小板抗体与其相关抗原结合后，被巨噬细胞吞噬所致。急性ITP血小板破坏是由于病毒抗原吸附于血小板表面，并与相应的抗病毒抗体结合，导致血小板被破坏。 　　2.1 ITP患者的血小板特异性自身抗体ITP被公认为自身免疫性疾病，其患者体内存在着针对血小板的特异性抗原的自身抗体，发现这些特异性抗体必然有助于ITP的诊断。但是，由于血小板自身固有的特性，血小板表达IgG的Fc受体(FcrR 1I型)在每个血小板上大约有1000~2000个，相对较大数量的非特异性结合抗体干扰血小板特异性抗体水平的检测，使得特异性抗体的实验室检测的特异性低[8]。 　　近年来国内外发展了一系列关于ITP血小板自身特异性抗体检测的方法，其中以单克隆抗特异性俘获血小板抗原试验（Monoclonal antibody immobilization ofplatelet antigen assay，MAIPA）为主要代表。MAIPA的原理是固相化的抗血小板单抗与血小板上相应的抗原决定簇结合后能将后者固相化，然后加入酶标记的另一种抗血小板抗体与固相化的血小板上相应为点结合并显色，显色的深浅与血小板抗体的浓度呈正比[10]。MAIPA法检测血小板特异性抗原特异性的自身抗体特异性较高,对于免疫性与非免疫性血小板减少的鉴别具有较大的意义，有助于ITP的诊断。王述文[11]等利用MAIPA法检测了70例血小板减少性紫癜患者的自身抗体，结果发现免疫性血小板减少患者显著高于非免疫性血小板减少患者。王谦[12]等应用改良MAIPA试验双盲法检测患者血小板膜糖蛋白特异性自身抗体，发现ITP患者血小板特异性抗体阳性率显著高于非免疫性血小板减少患者，血小板特异性抗体水平与血小板数量呈负相关。 　　但是MAIPA仍存在不足之处，首先不能鉴别特发性血小板减少与继发性免疫性血小板减少，如ITP与系统性红斑狼疮、干燥综合症等的鉴别诊断；其次国内外各实验室的方法有差异，未制定统一标准。因此MAIPA在临床上的应用仍受限制。 　　2.2 ITP患者的血小板相关抗体上世纪70年代，血小板相关免疫球蛋白（platelet associated immunoglobulin，PAIg）被认为是ITP诊断和预后判断的重要指标。PAIg是病理性免疫反应所产生的针对血小板膜糖蛋白II b/Ilia、Ib/IX、Ia/II a等抗原的自身抗体，其中以PAIgG最为常见。PAIgG的检测分为直接法和间接法，直接法测定血小板PAIgG（包括血小板表