白菜型冬油菜根腐病室内药剂筛选和药效试验.docVIP

白菜型冬油菜根腐病室内药剂筛选和药效试验 　　摘要：采用7种药剂对引起白菜型冬油菜根腐病的半裸镰刀菌和尖孢镰刀菌进行了室内药剂筛选和毒力测定，结果表明，苯甲?丙环唑、十三吗啉、苯醚甲环唑、恶霉灵4种药剂对半裸镰刀菌和尖孢镰刀菌的EC50均较小，毒力较强，对半裸镰刀菌的EC50分别为0.15、15.67、22.61、67.45 μg/mL，对尖孢镰刀菌的EC50 分别为2.11、11.78、8.56、62.41 μg/mL。采用7种药剂对冬油菜种子拌种，进行了室内药效试验，结果表明，苯甲?丙环唑、苯醚甲环唑、十三吗啉、恶霉灵4种供试药剂对半裸镰刀菌和尖孢镰刀菌的防效显著高于其他3种药剂，平均防效达60%。 　　关键词：白菜型冬油菜；根腐病；药剂筛选；毒力测定；药效试验 　　中图分类号：S 634.3文献标识码：A文章编号：1009??5500(2014)03??0031??06 　　基金项目：农业部公益性行业科研专项（20090300204）资助 　　 　　 　　冬油菜为甘肃省主要油料作物之一，栽培面积占全省油料作物的14.9%，产量占13.3%\[1\]。随着冬油菜栽培面积的扩大，冬油菜根腐病也普遍发生，李荣峰等\[2\]报道，5月中下旬调查其田间发病率严重时达6.4%。冬油菜根腐病典型症状是在靠近地面处出现褐色病斑，病斑略微凹陷，植株生长不良，生长缓慢，根茎部膨大，易拔段。冬油菜根腐病的发生严重影响了冬油菜的品质和产量。目前，在农业生产和园林栽培中，化学防治方法是防治多种植物根腐病的重要手段\[3-9\]。因此，筛选新型、高效、低毒的杀菌剂，来防治冬油菜根腐病，显得非常有必要。为此，试验针对半裸镰刀菌和尖孢镰刀菌两种病原菌，采用7种药剂进行室内毒力测定和药效试验，筛选对2种病原菌抑制效果好的药剂，旨在为冬油菜生产实践中根腐病的防治提供一定的参考依据。 　　1材料和方法 　　1.1供试材料 　　供试油菜陇油9号品种，由甘肃农业大学农学院提供；采用PDA培养基和WA培养基\[10\]；半裸镰刀菌（Fusarium semitectum）、尖孢镰刀菌（F.oxysprorum）病原菌均分离自兰州市秦王川开发区白菜型冬油菜根腐病根组织，由甘肃农业大学病原实验室保存备用；供试药剂25%嘧菌酯悬浮剂购自河北省农药化工有限公司、99%恶霉灵可湿性粉剂购自山东省烟台鑫润精细化工有限公司、86%十三吗啉油剂购自浙江世佳科技有限公司、77%硫酸铜钙可湿性粉剂购自江苏龙灯化学有限公司、85%波尔?甲霜灵可湿性粉剂购自江苏龙灯化学有限公司、30%苯甲?丙环唑乳油购自浙江世佳科技有限公司、25%苯醚甲环唑乳油购自华北制药集团爱诺有限公司。 　　1.2试验方法 　　1.2.1药剂对病原菌菌丝生长的影响参照文献\[11\]方法，将7种供试药剂按推荐浓度，设5个浓度梯度，分别为：25%嘧菌酯悬浮剂200、100、50、25、12.5 μg/mL；99%恶霉灵250、125、62.5、31.25、15.625 μg/mL；86%十三吗啉油剂107.5、53.75、25.875、13.438、6.718 μg/mL；77%硫酸铜钙可湿性粉剂2 310、1 155、577.5、288.75、144.375 μg/mL；85%波尔?甲霜灵可湿性粉剂1 360、680、340、170、85 μg/mL；25%苯醚甲环唑乳油125、62.5、31.25、15.625、7.813 μg/mL；30%苯甲?丙环唑乳油60、30、15、7.5、3.75 μg/mL。取1 mL预先配制好的母液加到灭菌冷却至50 ℃的49 mL PDA 培养基中，摇匀，倒入3个灭菌培养皿中制成设计所需浓度的含毒平板，然后用6 mm 打孔器在预先培养好的病菌菌落边缘打取菌饼，并置于不同药剂浓度的PDA平板上，菌丝面朝下，每皿1个菌饼，以无菌水作对照。最后将培养基置于25 ℃培养箱中培养，3 d后用十字交叉法统计菌落直径（cm），算出菌落生长直径（对照菌落直径-0.6），并计算药剂抑菌率。 　　抑菌率（%）=\[（菌落直径-0.6）-（处理菌落直径-0.6）\]/（对照菌落直径-0.6）×100% 　　将药剂浓度转化为对数值（x），为横坐标，再将抑菌率转化为机率值（y），为纵坐标，求出线性毒力回归方程y=a+bx，然后根据回归方程求出各药剂的EC50和浓度对数与几率值之间相关系数r。 　　1.2.2种子处理在无菌操作下，取适量的供试陇油9号种子，经75%的酒精表面消毒1 min，无菌水冲洗3次后，自然晾干，后用供试药剂相应质量浓度的药液对晾干的冬油菜种子进行拌种，药种比1∶30，拌种好的种子晾干备用。 　　1.2.3室内药效试验参考文献\[12\]的方法，在预先培养好的供试病菌菌落边缘用6 mm