动物克隆及研究进展.pptVIP

MOVIE 主要内容 一、克隆定义 克隆定义 饥饿技术 即在供体细胞的培养基中降低营养物质（血清）的浓度，使供体细胞处于“饥饿状态”，停止分裂增殖而休眠。休眠的细胞核进入去核的卵细胞后，在卵细胞的细胞质作用下重新启动分裂程序。这样，供体的细胞核与受体的细胞质才能在分裂相上相互协调，配合细胞才能分裂发育。 ②去卵膜和卵核 如何给受体细胞去核？ ◆ 显微操作 ◆ 紫外照射 ◆ 细胞松弛素结合高速离心 ③供体细胞制备 如何获取供体细胞核？ ◆ 显微操作 ◆ 细胞松弛素结合高速离心 核体 胞质体 ④移核 ◆ 去核卵细胞胞浆内显微注射 ◆ 核体透明带下注射，再刺激核体与胞质体融合 ⑤移植后重组细胞的激活、培养、胚胎移植 ◆ 激活 （使卵母细胞从M II 期解放，转到“受精”状态） ◆ 重组胚的体内或体外培养 ◆ 胚胎移植 * 大家，下午好！ Good afternoon， Everyone！ 动作片 悬疑片 爱情片 恐怖片 科幻片 纪录片 动物克隆技术 及其研究进展 组员：贾蕊 蒋敏 李朋 克隆的技术方法 2. 克隆的前沿应用及意义 3. 克隆的定义 1. 克隆来源于英语“clone”或“cloning”的音译，起源于希腊文“Klone”，原意是用“嫩枝”或“插条”繁殖。曾译为无性生殖或无性繁殖，即由同一个祖先细胞分裂而形成的纯细胞系，这个细胞系每个细胞的基因彼此是相同的。 随着分子生物学的发展，通过核移植与基因工程等技术也可获得无性系，于是人们把实现无性繁殖的操作称之为克隆，克隆由名词转化为动词。 克隆=复印 1997年3月WHO解释：克隆是遗传上同一的机体和细胞系（株）的无性生殖 二、克隆的技术方法 问题： 克隆过程需要哪些技术方法呢？ 二、克隆的技术方法 克隆主要包括以下技术： 1.核移植技术 2.细胞融合技术 3.胚胎移植技术 4.胚胎分割技术 指借助显微操作技术或徒手操作方法，切割早期胚胎成2、4等多等份，再移植给受体母畜，从而制造同卵多仔后代的技术。 1、核移植技术原理和方法 二、克隆的技术方法 将受体卵细胞 去核 向去核卵细胞植入供体细胞 移植后的细胞激活后可以象受精卵一样发育形成动物个体，并具有与核供体细胞相同的基因 MP：雄原核，male pronucleus PB：极体，polar body FP：雌原核，female pronucleus 二、克隆的技术方法 2、核移植技术的定义： ◆细胞核移植技术是一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的精细技术。 ◆细胞核移植所得到的杂种称之为核质杂种。 二、克隆的技术方法 3、核移植技术的分类： 根据核供体细胞来源不同： ◆ 胚胎、胎儿细胞——胚胎细胞核移植 胚胎卵裂球、干细胞和胎儿成纤维细胞等 ◆ 体细胞——体细胞核移植 根据供体细胞与受体细胞是否来源于同一种动物： ◆同种核移植 ◆异种核移植 二、克隆的技术方法 4、核移植技术的发展历史： 德国胚胎学家汉斯.施佩曼博士 ● 1938年第一个提出对动物进行细胞核移植实验 ●构想----“奇异的实验” 二、克隆的技术方法 4、核移植技术的发展历史： ●1952年布里格斯等科学家利用两栖类卵细胞建立了细胞核移植技术； ● 1955年，布里格斯和金把一个青蛙的体细胞的核移植到一个去核卵母细胞中，发育成了蝌蚪，其中许多蝌蚪发育成了未成年青蛙； 二、克隆的技术方法 4、核移植技术的发展历史： ●1958至1964年，英国剑桥大学以非洲爪蟾体细胞为材料进行了细胞核移植，证明体细胞核具有全能性。 二、克隆的技术方法 4、核移植技术的发展历史： ●1981年瑞士日内瓦大学的卡尔·伊尔门泽和美国杰克逊实验室的彼得·霍佩用鼠胚胎细胞培育出发育正常的小鼠。取得哺乳动物胚胎细胞核移植研究的最初成果。 1981年1月Science杂志 二、克隆的技术方法 4、核移植技术的发展历史： ●从1961年开始，童第周等以金鱼和鳑鮍鱼为材料，进行鱼类不同亚科间的细胞核移植获得成功。 ● 1989年，童第周、牛满江又将鲫鱼胚胎细胞核移入鲤鱼去核的未受精卵中，实现了不同种间的核质杂交，成功地无性繁殖了“鲤鲫核鱼”新品种。 二、克隆的技术方法 5、核移植技术的技术要点： 以鱼类细胞核移植为例： ①供体和受体的准备 ②去卵膜和卵核 ③供体细胞制备 ④移核 二、克隆的技术方法 6、克隆羊多莉的培育 问题： ◆ 3个母亲克隆出多莉，3只公羊能克隆出一只小公羊来吗？ ◆ 多莉100％是白面绵羊的复制品吗？ 二、克隆的技术方法 6、克隆羊多莉的培育