磁珠分离细胞术1220.pptVIP

磁珠分选技术 磁珠分选技术 免疫学+细胞生物学+磁力学 基于抗体对抗原的特异性识别：免疫磁珠 磁性微珠直接或者间接偶联在抗体上，从而与细胞相连：抗体偶联磁珠、二抗磁珠、生物素磁珠、Oligo dT磁珠 在高强度、梯度磁场中达到磁性分离的目的：分离细胞、蛋白、核酸、细菌等 磁珠分选系统 磁珠 磁力架 分离柱或分离试管 MACS，Dynal，BD，StemCell，RD… 柱式分选 MACS d≈50nm，多聚糖和氧化铁组成的超顺磁化微粒；可被细胞生物降解而无需解离磁珠；分离丰度极小的细胞(10-8); Dynal d=4.5um﹑2.8um﹑1um，多聚材料包被的氧化铁超顺磁微球；均一性好；也适用于细胞活化； BD d≈200nm，超顺磁化微粒；包被了高质量的BD抗体； StemCell 管式；柱式; RD d≈150nm，链酶亲和素磁珠，类胶体. 分选策略 阳性分选 去除分选 多重分选 优点：操作简单，高效快捷，无菌和细胞状态更有保证，回收率、纯度高。 缺点：不能在分选的同时进行分析，分选过程中很难去除死细胞团块的干扰，难于同时进行多种标记物的分选。 * 管式分选 Dynalbeads? Dynalbeads 分离试管 磁力架 未标记的细胞先行流出 MACS微珠进行磁性标记 撤去磁场，将标记的细胞洗出 磁性铁珠在分选器作用下形