2019《600分考点700分考法a版高考生物》第十七章生物技术在其他方面的应用.pptxVIP

第十七章　生物技术在其他方面的应用 考点44 DNA、血红蛋白的提取 考点45 植物有效成分的提取 考点44 DNA、血红蛋白的提取 高考考法突破 考法1 有关DNA和蛋白质的提取和分离 应试基础必备 应试基础必备 DNA和蛋白质分离提取的比较 提取物质 提取方法 提取原理 步骤 DNA 盐析法 在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精，但蛋白质溶于酒精 溶解在2 mol/L的NaCl溶液中→加水稀释至 0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出，过滤→用2 mol/L NaCl溶液溶解并过滤→加入冷酒精析出 血红 蛋白 凝胶色谱法、电泳法 根据相对分子质量的大小；各种分子带电性质差异 样品处理→粗提取→纯化→纯度鉴定 （1）DNA提取实验操作分析 ① 4次过滤的比较 第一次过滤 第二次过滤 第三次过滤 第四次过滤 滤液中 含DNA的核物质 DNA 溶于0.14 mol/L NaCl溶液的杂质 DNA 纱布上 细胞膜、核膜 等残片 不溶于2 mol/L NaCl溶液的杂质 DNA 不溶于2 mol/L NaCl溶液的杂质 过滤前加入 蒸馏水 NaCl溶液 蒸馏水 NaCl溶液 过滤的目的 去除细胞膜、 核膜等杂质 去除不溶于2 mol/L NaCl溶液的杂质 去除溶于0.14 mol/L NaCl溶液的杂质 去除不溶于2 mol/L NaCl溶液的杂质 高考考法突破 考法1 有关DNA和蛋白质的提取和分离 1.DNA的粗提取和鉴定 ②2次加蒸馏水的作用 a.加入鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破； b.加入含DNA的2mol/L NaCl溶液中，使其稀释，从而析出DNA。 ③3次使用纱布的作用 a.过滤血细胞破裂液，提取细胞核物质(DNA在滤液中)； b.过滤0.14mol/L NaCl溶液，滤出DNA(DNA在黏稠物中)； c.过滤溶有DNA的2mol/L NaCl溶液(DNA在滤液中)。 ④3次使用 NaCl溶液的作用 a.2mol/L NaCl溶液，溶解DNA，去除不溶于该溶液的杂质； b.0.14mol/L NaCl溶液，使DNA析出； c.2mol/L NaCl溶液，溶解滤出的DNA黏稠物。 （2）DNA的鉴定：DNA在沸水浴条件下，遇二苯胺会变蓝色。 （1）常用的蛋白质分离方法 ①凝胶色谱法（根据香港对分子质量大小分离蛋白质） 相对分子质量大 相对分子质量小 凝胶内部 排阻在凝胶颗粒外面，迅速通过 进入凝胶颗粒内部，被滞留 运动方式 垂直向下 垂直向下和无规则扩散运动 运动路程 较短 较长 洗脱次序 先流出 后流出 【注意】a.凝胶色谱柱的直径大小不影响分离效果，但直径过大造成洗脱液体积大，样品稀释度大；凝胶色谱柱的高度与分离度有关。 b.加快干凝胶膨胀的方法：可将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，逐渐升温至接近沸腾，通常只需1～2 h。这种方法不但节约时间，而且可以除去凝胶中可能带有的微生物，排出胶粒内的空气。 2.血红蛋白的提取和分离方法 ②电泳法（带电粒子在电场作用下发生迁移） a.在一定pH下，一些生物大分子(如多肽、核酸等)可解离的基团会带上正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。 b.由于分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。判断纯化的蛋白质是否达到要求使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法。 （2）蛋白质提取过程中需注意的问题 ①红细胞的洗涤与离心要求：红细胞洗涤过程中，洗涤三次后，上清液仍有黄色，可增加洗涤次数，否则无法除去血浆蛋白；离心时转速要低，时间要短，否则白细胞等会一同沉淀，达不到分离效果。 ②蒸馏水和甲苯的作用：血红蛋白释放过程中，蒸馏水的作用是涨破红细胞，甲苯的作用主要是溶解细胞膜。 ［江苏生物2015·25，3分］图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图,下列叙述正确的是（多选） ） A.图1、2中加入蒸馏水稀释的目的相同 B.图1中完成过滤之后保留滤液 C.图2中完成过滤之后弃去滤液 D.在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质 例 【解析】图1中加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破，释放其中的核物质，图2中加入蒸馏水的目的是降低NaCl的浓度，使DNA的溶解度降低析出，A错误；由于DNA溶于水，所以图1中完成过滤后DNA存在于滤液中，需保留滤液，B正确；图2中DNA析出，则过滤后弃去滤液，保留黏稠物，C正确；在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉，其中的木瓜蛋白酶能够分解DNA中的杂质蛋白，有利于去除杂质，D正确。 【答案】BCD 考点45 生物材料中有效成分的提取 高