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下列有关基因工程中限制性内切酶的描述,错误的是( ) A.一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B.限制性内切酶的活性受温度影响 C.限制性内切酶能识别和切割RNA D.限制性内切酶可从原核生物中提取 解析 生物体内有能识别并切割特异性双链DNA序列的一种核酸内切酶,它是一种可以将外来的DNA切断的酶,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,这样可以保护细胞原有的遗传信息。由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故叫限制性内切酶(简称限制酶)。限制性内切酶只能识别和切割DNA,不能识别和切割RNA。 答案 C DNA连接酶的主要功能是( ) A.使DNA复制时母链与子链之间形成氢键 B.使黏性末端碱基之间形成氢键 C.将两条DNA末端之间的缝隙连接起来 D.将碱基、脱氧核糖、磷酸之间连接起来 答案 C 解析 DNA连接酶催化DNA双链外侧磷酸和脱氧核糖之间形成磷酸二酯键,它与碱基之间的氢键无关。 方法技巧警示 合理选择育种方法 作物育种方式包括杂交、诱变、单倍体育种、多倍体育种以及基因工程育种,育种的最终目的就是改变原有品种的遗传物质,培育出符合人类需要的新品种。在具体解题中,在正确区分不同育种的特点,恰当使用育种程序,对步骤综合分析,寻找出解题突破口。 [例1] 某植物的基因型为AaBB,通过不同的生物技术可以分别将它转变为以下基因型的植物: ①AABB ②aB ③AaBBC ④AAaaBBB 则所用到的生物技术排列正确的是( ) A.诱变育种、转基因技术、花药离体培养、细胞融合 B.杂交育种、花药离体培养、转基因技术、多倍体育种 C.花药离体培养、诱变育种、多倍体育种、转基因技术 D.多倍体育种、花药离体培养、诱变育种、转基因技术 解析 由于某植物的基因型为AaBB,通过AaBB与A_B_杂交,则可获得基因型为AABB的植物;选取AaBB的花粉进行离体培养,则可获得基因型为aB的单倍体;将外源基因C导入植物的某个细胞中,经组织培养获得基因型为AaBBC的植物;将植物AaBB用秋水仙素处理,则获得基因型为AAaaBBBB的四倍体植物。 答案 B 技法提炼 育种目的不同,选择育种方法也不同,具体分析如下: (1)将同一物种两亲本的性状集中到同一生物体上,可利用杂交育种,这是最简便的育种方法。 (2)将两物种的优良性状集中在一起,可用基因工程,也可用细胞杂交。 (3)若要快速获得纯种,可用单倍体育种方法。 (4)若要提高营养物质含量,可用多倍体育种方法。 (5)若要培育原物种没有的性状,可用诱变育种和基因工程,其中基因工程是有目的地改良。 (6)若培育植物为营养繁殖,如土豆、地瓜等,则只要出现所需性状即可,不需要培育出纯种。 对基因工程中一些观点辨析不清 [例2] 下列关于限制酶和DNA连接酶的理解,正确的是( ) A.其化学本质都是蛋白质 B.DNA连接酶可以恢复DNA分子中的氢键 C.它们不能被反复使用 D.在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶 答案 A 解析 限制酶与DNA连接酶的化学本质都是蛋白质;DNA连接酶连接的是两个DNA片段间相邻两个碱基间的磷酸二酯键;酶在化学反应前后其数量、性质、功能均不发生改变,因此可以反复利用;DNA聚合酶是在细胞内DNA分子复制时发挥作用的,不能替代DNA连接酶。 错因分析 对DNA连接酶和DNA聚合酶的化学本质、作用化学键和作用对象模糊不清。 纠错笔记 (1)限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用部位都是脱氧核苷酸之间形成的磷酸二酯键(不是氢键),只是一个切开,一个连接。 (2)质粒是最常用的运载体,不要把质粒同运载体等同,除此之外,噬菌体和动植物病毒也可作为运载体。运载体的化学本质为DNA,其基本单位为脱氧核苷酸。 (3)要想从DNA上切下某个基因,应切2个切口,产生4个黏性末端。 (4)DNA酶即DNA水解酶,是将DNA水解的酶;DNA聚合酶是在DNA复制过程中,催化形成新DNA分子的酶,是将单个游离的脱氧核苷酸加到DNA片段上,需要模板;但DNA连接酶是将两个DNA片段的两个缺口同时连接,不需要模板,两者作用的化学键相同,都是磷酸二酯键。 (5)原核生物基因(如抗虫基因来自苏云金芽孢杆菌)可为真核生物(如棉花)提供目的基因。 (6)限制酶在第一步和第二步操作中都用到,且要求同一种酶,目的是产生相同的黏性末端;第二步中两种工具酶都用到。 (7)受体细胞动物一般用受精卵,植物若用体细胞则通过组织培养的方式形成新个体。 (8)抗虫棉只能抗虫,不能抗病毒、细菌。 课 时 作 业 (点此链接) 2.(2013·全国卷,5)下列实践活动包含基因工程技术的是( ) A.水稻F1花药经培养和染色体加倍,获得基因型纯合新品
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