高考生物一轮复习课件选修3专题1基因工程.pptVIP

纠错笔记　①基因工程中有3种工具，但工具酶只有2种。 ②工具酶本质为蛋白质，载体本质为小型DNA分子，但不一定是环状。 ③标记基因的作用——筛选、检测目的基因是否导入受体细胞，常见的有抗生素抗性基因、发光基因，表达产物为带颜色物质等。 ④受体细胞中常用植物受精卵或体细胞(经组织培养)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物——大肠杆菌、酵母菌等。一般不用支原体，原因是它营寄生生活；一定不能用哺乳动物成熟红细胞，原因是它无细胞核，不能合成蛋白质。 课 时 作 业 （点此链接） 二、限制酶和DNA连接酶的区别与联系 限制酶 DNA连接酶 作用 切割目的基因或载体 将两个DNA片段连接 作用过程 基因工程第一、二步都用到了，且用的是同一种，目的是产生相同的黏性末端 基因工程第二步将目的基因与载体连接成重组DNA分子或形成基因表达载体 作用对象 及效果 都作用于磷酸二酯键，与氢键无关，但作用效果相反 酶的特性 有催化作用，可重复利用，受温度、pH等影响 A．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 解析　一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。 答案　A 除了下列哪一项之外，其余的都是基因工程的运载体所必须具备的条件(　　) A．能在宿主细胞中复制并保存 B．具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 C．具有标记基因，便于进行筛选 D．是环形状态的DNA分子 答案　D 解析　原核细胞如细菌的核DNA也是环状DNA，但不能作运载体，因为它不具备A、B、C三个条件。 基因工程的基本操作程序和应用 (3)将目的基因导入受体细胞： 生物种类 植物 动物 微生物 常用方法 农杆菌转化法 显微注射技术 感受态细胞法 受体细胞 体细胞 受精卵 原核细胞 转化过程 将目的基因插入到Ti质粒的T－DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的染色体DNA上→表达 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 (4)目的基因的检测与鉴定： 2．基因工程的应用 (1)乳腺生物反应器与工程菌生产药物的比较： 比较项目 乳腺生物反应器 工程菌 基因结构 动物基因的结构与人类基因的结构基本相同 细菌或酵母菌等生物基因的结构与人类基因的结构有较大差异 基因表达 合成的药物蛋白与天然蛋白质相同 细菌细胞内没有内质网、高尔基体等细胞器，产生的药物蛋白可能没有活性 受体细胞 动物的受精卵 微生物细胞 导入目的基因的方式 显微注射法 感受态细胞法 生产条件 不需严格灭菌，温度等外界条件对其影响不大 需严格灭菌，严格控制工程菌所需的温度、pH、营养物质浓度等外界条件 药物提取 从动物乳汁中提取 从微生物细胞中提取 (2)基因治疗与基因诊断： (1)限制酶剪切目的基因与质粒的次数不同：获取一个目的基因需限制酶剪切2次，共产生4个黏性末端或平末端，切割质粒则只需要限制酶剪切1次，因为质粒是环状DNA分子，而目的基因在DNA分子链上。 (2)目的基因的插入位点不是随意的：基因表达需要启动子与终止子的调控，所以目的基因应插入到启动子与终止子之间的部位。 (3)基因工程操作过程中只有第三步(将目的基因导入受体细胞)没有碱基互补配对现象。第一步存在逆转录法获得DNA，第二步存在黏性末端连接现象，第四步存在检测分子水平杂交。 (4)并非所有个体都可作为乳腺生物反应器：操作成功的应该是雌性个体，个体本身的繁殖速度较高，泌乳量、蛋白含量等都是应该考虑的因素。 (5)DNA复制、PCR技术与基因克隆 DNA复制 PCR技术 基因克隆 场所 细胞核 生物体外 细胞内 酶 解旋酶、 DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶 限制酶、 DNA连接酶 载体 不需要 不需要 需要 遵循原则 碱基互补配对 碱基互补配对 碱基互补配对 结果 DNA分子 DNA分子片段 DNA分子片段 A．①②　 B．②③　 C．③④　 D．④① 解析　根据基因工程一般要经历四个步骤分析，上述③④操作是正确的。①将毒素蛋白注射到棉受精卵中，没有获得目的基因，②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中，没有将目的基因与载体结合，所以①②是错误的操作。 答案　C (2015·银川质检)科学家将发光基因导入烟草细胞内，培育出了发光的烟草(如图)，下列有关该过程中应用的技术的叙述，不正确的是(　　) A．该技术是在DNA水平上进行设计和施工的 B．该技术的操作环境是在生物体内 C．该技术的原理是基因重组 D．该技术的优点是定向产生人类需